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申请/专利权人：黑龙江省林业科学院伊春分院

摘要：本发明公开了利用黑木耳菌糠提取液提升桑黄次生代谢产物产量的方法，首先用较低碳氮比的桑黄液体培养基以及最适宜桑黄菌种生长的pH来培养桑黄菌种，同时由于桑黄液体培养基中添加有黑木耳菌糠提取液，促进了桑黄菌丝体生长以及菌丝体中次生代谢产物多糖、黄酮、多酚的大量累积以及三萜的少量累积；而随着桑黄菌丝的生长整个培养基的pH不断降低，此时更不利于三萜的累积，因此向桑黄液体培养基中加入新的氮源硝酸铵和在低浓度的CO胁迫下，并调高pH，在CO刺激和新的氮源和高pH的共同作用下促进三萜的快速累积；本发明能够同时大幅度提高多糖、黄酮、多酚和三萜四种次生代谢物产量，操作过程简单，实用性强。

主权项：1.利用黑木耳菌糠提取液提升桑黄次生代谢产物产量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、利用黑龙江当地通用的培养黑木耳后的黑木耳菌糠提取液配制桑黄液体培养基：黑木耳菌糠提取液200-300gL，葡萄糖10-20gL，硝酸铵0.1-0.15gL，余量为水；121℃下灭菌30min；并调节桑黄液体培养基的pH为5-6；其中，黑木耳菌糠为黑龙江当地通用的培养黑木耳后的菌棒，培养黑木耳后的菌棒的菌基由30%的硬木屑、40%的玉米芯、5%的麦麸和5%豆饼粉以及余量水组成；黑木耳菌糠提取液的制备过程为以下两种方式的一种：方式一、选取干燥、无霉变的黑木耳菌糠粉碎至60目，取200g粉碎后的黑木耳菌糠加入到1000mL水中，小火煮沸20min；之后用8层纱布过滤收集滤液，滤液补水至1000mL，得到黑木耳菌糠提取液；方式二、选取干燥、无霉变的黑木耳菌糠，与水按照质量比3:7混合后放入发酵罐中有氧发酵，当温度达到55℃以上时保持温度24h以上，开始翻堆，补充水分，整个发酵期间翻堆2次-3次，过滤收集滤液，得到黑木耳菌糠提取液；S2、取100mL桑黄液体培养基装入250mL三角瓶中，将活化的桑黄液体菌种按10%接种量接种到桑黄液体培养基中，于25℃、110rmin转速下恒温震荡培养4d；S3、在桑黄液体培养基中添加硝酸铵0.1-0.15gL，然后调节桑黄液体培养基的pH为6-7，放入发酵罐中，再向发酵罐中通入CO气体，发酵罐中CO气体的浓度为20-30ppm；然后于25℃、110rmin转速下继续恒温震荡培养2d；S4、将液体培养物用纱布过滤得到桑黄菌丝，于60℃下烘干至恒重，研磨成粉末，然后分别定量测定桑黄次生代谢产物中多糖、黄酮、多酚和三萜的产量。

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