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申请/专利权人：华南师范大学
摘要：本发明属于农业生物技术领域，涉及家蚕育种技术领域，具体涉及一种杂食性家蚕的分子育种方法及应用。本发明以家蚕味觉受体GR43为靶基因，设计靶向其第一个外显子的sgRNA，通过基因编辑技术敲除该基因，证明了缺失GR43的家蚕突变体可以取食多种非寄主植物，食谱范围大大拓宽，成为了一种杂食性家蚕，并且该突变体家蚕在人工饲料上的存活率也显著高于野生型家蚕，有利于家蚕的大规模饲养。可见，本发明获得了一种杂食性家蚕，大大拓宽了家蚕的食谱，十分有利于寻找可替代桑叶的非寄主植物来饲养家蚕。此外，该杂食性家蚕在人工饲料上的存活率也显著高于野生型家蚕，有利于家蚕的大规模人工饲养。
主权项：1.一种杂食性家蚕的分子育种方法，其特征在于，通过基因编辑技术使家蚕缺失GR43基因或使家蚕的GR43基因表达量降低，从而培育出杂食性家蚕；具体包括以下步骤：S1、针对家蚕GR43基因设置引物，对家蚕基因组cDNA进行PCR扩增，扩增获得的GR43全长cDNA的核酸序列如SEQIDNO：6所示；S2、以家蚕GR43基因的外显区域作为靶位点合成sgRNA引物，然后通过PCR法从家蚕cDNA扩增产物中获得sgRNA的双链DNA，再体外转录合成sgRNA；S3、用步骤S2的sgRNA与cas9蛋白对家蚕基因组DNA进行切割，获取具有体外切割活性的sgRNA；S4、将步骤S3的sgRNA与cas9蛋白一起注入发育早期的家蚕卵内，然后将鉴定出GR43基因发生了移码突变的阳性个体与野生型个体交配，再从下代挑选发生了移码突变的阳性个体进行自交，最后从自交后代中鉴定出纯合的缺失突变体，即为杂食性家蚕。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南师范大学 一种杂食性家蚕的分子育种方法及应用方法
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