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申请/专利权人：西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
摘要：本发明涉及一种家蚕外源RNA侵染检测方法及其应用，利用腺苷脱氨酶ADAR介导的RNA编辑将外源基因mRNA的检测和报告基因的翻译结合，通过报告基因的表达水平变化，对含有目标外源RNA的家蚕细胞进行标记与操作。本发明提供的家蚕外源RNA感应与效应系统，可以直接检测、标记和操作含有目标外源RNA的家蚕细胞。该系统在家蚕中以简单、通用和可推广的方式发挥作用，能够有效的对含有目标外源RNA的家蚕细胞进行标记与操作，为家蚕的分子免疫研究及蚕病预防控制奠定坚实基础，具有广泛的应用前景。
主权项：1.一种家蚕外源RNA侵染检测方法，其特征在于，将一个或多个不同的外源RNA感应系统导入家蚕细胞中进行表达，所述外源RNA感应系统的基本结构如式1所示：式15’X-A-exo-sesRNA-B-Y3’其中，X为内参基因Marker，A为自剪接肽1，exo-sesRNA为含有UAG密码子的用于感应trgRNA存在的RNA序列，所述trgRNA由外源靶标基因所编码，B为自剪接肽2，Y为报告基因Reporter；其中，内参基因的翻译不受RNA感应影响，自剪接肽用于释放内参基因和报告基因，当家蚕细胞在受到外源RNA侵染后，exo-sesRNA会和外源靶标基因编码的trgRNA匹配并结合，招募ADAR，使exo-sesRNA中的UAG密码子变为UIG密码子，令报告基因正常翻译，而在未受到目标外源RNA侵染时，家蚕内源性mRNA无法正确匹配并结合exo-sesRNA，影响ADAR的招募，进而抑制报告基因的翻译，通过检测报告基因的翻译情况对家蚕细胞受外源RNA侵染的情况进行检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 一种家蚕外源RNA侵染检测方法及其应用
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