龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！
申请/专利权人：深圳市先康达生命科学有限公司
摘要：本发明公开了一种基于多肽介导的CAR‑T细胞制备方法，包括步骤：氨基酸合成多肽；设计与T细胞相同的gRNA核苷酸序列；TrueCutCas9蛋白与gRNA混合孵育后获得RNP复合物；RNP复合物与多肽复合制得多肽‑RNP复合物；多肽‑RNP复合物与T细胞混合孵育，在T细胞的TRAC基因上制造DNA切口；构建含外源CAR的DNA片段的同源介导修复模板；同源介导修复模板构建在AAV病毒上；AAV病毒及含双链DNA切口的T细胞孵育，获得CAR‑T细胞。该方法制备CAR‑T细胞，利用多肽穿透内吞作用，携带RNP复合物进入细胞后，使TrueCutCas9蛋白在TRAC‑gRNA的引导下制造出DNA切口，实现了高效的基因编辑，并可减少了对T细胞的物理损伤，有利于维持细胞的正常功能。
主权项：1.一种基于多肽介导的CAR-T细胞制备方法，其特征在于，包括如下步骤：利用Fmoc固相肽合成法，将氨基酸合成多肽；采用CRISPRCas9编辑技术，根据目标T细胞的TRAC基因外显子的核苷酸序列，设计TRAC-gRNA核苷酸序列；将TrueCutCas9蛋白及设计好的TRAC-gRNA混合孵育后获得RNP复合物；将RNP复合物与合成得到的多肽混合孵育5min，形成多肽-RNP复合物；将多肽-RNP复合物与T细胞混合孵育，在T细胞的TRAC基因的外显子基因处制造双链DNA切口；设计与所述双链DNA切口左右两侧相同核苷酸序列的左右同源臂，并在所述左右同源臂中间设计外源性CAR的DNA片段，获得同源介导修复模板；将所述同源介导修复模板构建在AAV病毒上；将AAV病毒及含双链DNA切口的T细胞置于T细胞培养基中进行孵育，获得基于多肽介导的CAR-T细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳市先康达生命科学有限公司 一种基于多肽介导的CAR-T细胞制备方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号