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申请/专利权人：西华师范大学

摘要：本发明公开了一株枯草芽孢杆菌XH‑2及其在防治小麦赤霉病中的应用，其生物菌分离与筛选方法为：选取健康小麦周围5～15cm的土壤于无菌水中搅拌混匀，静置20min后吸取上清液100μl涂布于PDA培养基上，30℃培养1～2d，挑取形态各异的菌落划线纯化培养，将纯化后的单菌落连续纯化培养3次后保存备用。挑取纯化的细菌接种与PH‑1菌株进行对峙培养，本发明涉及生防菌农作物治理技术领域。该枯草芽孢杆菌XH‑2及其在防治小麦赤霉病中的应用，XH‑2可作为赤霉病防治的有效生防菌资源，且具有一定的广谱性。不仅对农作物真菌病害有防治作用，还对药用植物如半夏的真菌病害有良好的防治效果。又不影响作物的正常生长过程。

主权项：1.一株枯草芽孢杆菌XH-2及其在防治小麦赤霉病中的应用，其特征在于，其生物菌分离与筛选方法为：选取健康小麦周围5～15cm的土壤于无菌水中搅拌混匀，静置20min后吸取上清液100μl涂布于PDA培养基上，30℃培养1～2d，挑取形态各异的菌落划线纯化培养，将纯化后的单菌落连续纯化培养3次后保存备用。挑取纯化的细菌接种与PH-1菌株进行对峙培养；所述发酵液和孢悬液的制备方法为：发酵液的制备：挑取XH-2菌株于3ml的PDB培养基中28℃，180rpm摇培8～12h作为种子液，按1∶100种子液：培养基的比例取种子液到新的PDB培养基中摇培24h，随后将摇培24h后的菌液12000rpm离心10min，取上清液用细菌滤器过滤除菌，滤液即为发酵液，将发酵液稀释成1×、10×、100×后用于后续各实验；PH-1孢悬液：用无菌黄色枪头戳取4个PH-1菌块置于50ml的CMC产孢培养基中，28℃，180rpm摇培3～5d后用无菌滤布过滤，将滤液8000rpm离心10min后用无菌ddH2O重悬，用细胞计数板测量孢子浓度，调整孢子浓度为1×106个ml，后续侵染实验将孢悬液与发酵液按1∶1的比例体积比混合后接菌，使孢子终浓度为5×105个ml；Guy11孢悬液的制备：蒋Guy11接种于CM平板，于25℃培养10d后，用无菌ddH2O洗下分生孢子，8000rpm离心3min后去上清，用无菌ddH2O重悬，用细胞计数板测量孢子浓度，调整孢子浓度为5×105个ml。后续侵染实验将孢悬液与发酵液按1∶1的比例体积比混合后接菌，使孢子终浓度为2.5×105个ml；NC-1孢子悬浮液的制备方法同Guy11孢子制备方法。

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