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申请/专利权人：天津科技大学

摘要：本发明属于多肽提取技术领域，涉及一种连翘叶蛋白酶解多肽及其制备和应用，包括：首先，超声辅助碱溶酸沉法提取连翘叶蛋白，再经透析；经真空冷冻干燥，得到连翘叶蛋白粉；其次单酶酶解；最后超滤分离多肽。本发明以连翘叶粉为原料，首先采用超声辅助碱溶酸沉法提取其中的蛋白质，其次采用胰蛋白酶水解连翘叶蛋白，获取连翘叶多肽，生产过程绿色环保，产物具备较好抗氧化活性和抗炎活性，可应用于食品、保健品、药品、化妆品等领域，本发明可显著提高连翘叶利用价值。

主权项：1.一种连翘叶蛋白酶解多肽的制备方法，其特征在于：制备步骤如下：⑴超声辅助碱溶酸沉法提取连翘叶蛋白将洁净干燥的连翘叶原料粉碎过筛，得到连翘叶粉碎料；取适量的连翘叶粉，以1g：15-35ml的料液比加入蒸馏水，NaOH水溶液调节pH至7.5-9.5，超声处理20-60min，45-60℃恒温搅拌30-120min，然后7000rmin离心10-15min，弃去沉淀；稀盐酸调节上清液pH值至2.5～3.5，7000rmin离心10～15min，保留沉淀；再用NaOH水溶液调节pH为中性，透析；经真空冷冻干燥，得到连翘叶蛋白粉；⑵酶解将冻干的连翘叶蛋白粉加蒸馏水配制成1％-3％的连翘叶蛋白溶液，用NaOH的水溶液调节pH至7.0-9.0，水解温度为35-55℃,加入酶添量为4000-8000Ug的胰蛋白酶，水解3-5h，在水解过程中通过加入1molLNaOH水溶液将反应液pH始终维持在7.0-9.0；酶解结束后，将体系置于90℃水浴中15-20min以终止酶解反应；之后7000rmin条件下离心10-20min，取上清液，得到连翘叶蛋白酶解液；⑶超滤分离多肽将步骤⑵中连翘叶蛋白酶解液置于超滤离心管中，分别经不同截留分子量的超滤膜超滤离心，获得不同分子量范围的连翘叶酶解多肽；所述透析用透析袋预先经30％-50％乙醇煮沸，蒸馏水洗涤，然后经10-30％丙酮水溶液改性处理4-8小时，改性后的透析袋具有更好的耐污染性能和非极性有机小分子透过率；所述步骤⑶超滤先经10kDa的超滤膜截留，取出＜10kDa的部分，再次使用3kDa的超滤膜截留，保留3kDa、3～10kDa和＞10kDa的部分；所述步骤⑴中的透析方法为：经1000-3500截留分子量的透析袋透析4-8小时。

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