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申请/专利权人：北京航空航天大学
摘要：本发明公开了一种用于微生物孢子的快速检测方法。1微生物孢子收集，空气中的微生物孢子收集自空气采样器滤网，表面微生物孢子收集自采样拭子；2非孢子微生物去除；3微生物孢子离心、浓缩、热裂解；4检测试剂配制与微生物孢子AMP检测；5微生物孢子数量计算。本发明适用于对洁净间空气和表面微生物孢子进行检测，相较于常规微生物孢子培养的检测丰富，本方法更加便捷，检测时间和所需成本大幅降低，可实现洁净间空气和表面微生物孢子的即时检测，显著提高了微生物孢子检测能力。
主权项：1.一种微生物孢子的快速检测方法，该微生物孢子的快速检测方法使用AMP、UTP和荧光素荧光素酶溶液进行荧光反应，其特征在于，所述微生物孢子存在于经过消杀的洁净间环境中，取样步骤如下：1微生物孢子收集：空气中的微生物孢子收集自空气采样器滤网，表面微生物孢子收集自采样拭子；2非孢子微生物去除：对滤网拭子上的微生物孢子进行洗脱，对洗脱液进行80℃热激去除非孢子微生物；3微生物孢子离心、浓缩、热裂解：12000rpm离心取沉淀，将195℃热裂解后的样品作为待检测的微生物孢子样本；检测步骤如下：1使用移液器吸取50μL待测样本至特定反应容器；2使用移液器吸取50μLUTP溶液至所述特定反应容器中，与样品混合静置5min，使待测样品中的AMP与UTP充分反应；所述UTP溶液浓度为0.01mmolmL；3将所述特定反应容器放置于单光子计数器感光区，加入50μL荧光素荧光素酶溶液获得荧光强度；4根据标准曲线，计算微生物孢子数量，以50μL二次水为空白对照，以50μL梯度AMP溶液为标准液绘制标准曲线；微生物孢子的快速检测方法，试剂配制步骤如下：1所述荧光素荧光素酶溶液：荧光素浓度为0.1mmolmL，荧光素酶浓度为0.1mgmL，-18℃保存；2所述AMP标准溶液：AMP标准溶液母液浓度为5mgmL，共稀释6个梯度，0.5mL管分装，-18℃保存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京航空航天大学 一种用于微生物孢子的快速检测方法
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