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申请/专利权人：北京豪迈生物工程股份有限公司

摘要：本申请公开了一种全血检测甲状旁腺素的试剂盒及其使用方法，涉及免疫检测的技术领域，解决了相关试剂盒在使用时检测用时长的问题。试剂盒包括盒体，盒体内设有若干个装有不同试剂的试剂管，所述试剂中，R1试剂为结合有磁分离试剂的抗红细胞抗体，R2试剂为HRP标记的PTH单抗溶液，所述R3试剂为Acridan标记的PTH单抗溶液，所述R4试剂为生理盐水。本申请试剂盒使用方法包括：S1、于人全血中加R1试剂，磁分离后除红细胞，得液相；S2、于液相中加R2、R3试剂，孵育后得反应液；S3、于反应液中加入激发液隔离液，测定。本发明试剂盒用于检测人全血中的PTH含量，其具有检测用时少的优点。

主权项：1.一种全血检测甲状旁腺素的试剂盒，其特征在于，包括盒体，所述盒体内设有若干个装有不同试剂的试剂管，所述试剂管包括装有R1试剂的第一试剂管、装有R2试剂的第二试剂管、装有R3试剂的第三试剂管和装有R4试剂的第四试剂管；所述R1试剂为能够与人全血中的红细胞特异性结合的抗红细胞抗体，所述抗红细胞抗体上还结合有磁分离试剂；所述R2试剂为HRP标记的PTH单抗溶液，所述R3试剂为Acridan标记的PTH单抗溶液，所述R4试剂为生理盐水；所述R2试剂制备方法包括以下步骤：S2-1、取摩尔比为1:（1.3-1.6）的PTH单抗和HRP分别做脱盐处理后，将分别含有两种蛋白质的溶液混合后并浓缩，得到含有PTH单抗和HRP的第一浓缩液；S2-2、于所述第一浓缩液中加入BS3试剂，并在水浴环境下反应，使得PTH单抗和HRP交联，得到第二交联液，所述第二交联液中含有HRP标记的PTH单抗；所述BS3试剂和PTH单抗的质量比为（0.37-0.52）:1；S2-3、于所述第二交联液中加入甘氨酸溶液，用于结合未反应的活化氨基酸位点；S2-4、将步骤S2-3最终获得的溶液进行蛋白纯化，收集含有纯化后的HRP标记的PTH单抗的纯化液并浓缩，使得溶液中HRP标记的PTH单抗的浓度为0.6-1.1mgmL，即得HRP标记的PTH单抗溶液；S2-5、于S2-4中最终得到的溶液内加入第三缓冲液，使得所述HRP标记的PTH单抗的浓度为0.005-0.015mgL，最终得到的溶液即为所述R2试剂；最后将得到的R2试剂装入所述第二试剂管并密保存即可，第三缓冲液是将pH8.0的TRIS、NaCl、青霉素、羊血清和小鼠血清分别加入到纯水中制备得到；所述R3试剂制备方法包括以下步骤：S3-1、取PTH单抗进行脱盐处理，收集脱盐处理后的PTH单抗溶液；S3-2、将脱盐处理后的PTH单抗溶液浓缩至浓度为5-7mgmL，随后加入Acridan试剂，以使得Acridan试剂和PTH单抗交联，得到第三交联液，所述第三交联液中含有Acridan标记的PTH单抗；其中，添加的Acridan试剂和PTH单抗的质量比为（0.16-0.23）:1；S3-3、于所述第三交联液中加入甘氨酸溶液，使得溶液内未反应的活化氨基酸位点完全反应；S3-4、将S3-3最终得到的溶液进行脱盐，收集脱盐后的Acridan标记的PTH单抗溶液，其中，Acridan标记的PTH单抗浓度为0.9-1.0mgmL；S3-5、于脱盐后的Acridan标记的PTH单抗溶液中加入第四缓冲液，使得Acridan标记的PTH单抗的浓度为0.012-0.022mgL，即得到R3试剂；最后将得到的R3试剂装入所述第三试剂管并密保存即可，第四缓冲液是将pH8.0的TRIS、NaCl、青霉素、羊血清、小鼠血清分别加入到纯水中制备得到。

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