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申请/专利权人:内蒙古农业大学
摘要:本发明公开了一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法,涉及牛冠状病毒病毒样颗粒制备技术领域。以BCoV的S、M、E基因片段转化至感受态细胞中,获得杆粒DNA,命名为Bac‑S、Bac‑M、Bac‑E;转染至Sf9细胞液,收集P2代病毒液,裂解,得到重组杆状病毒rBac‑S、rBac‑M、rBac‑E;按照1:1.72:0.36的比例进行混合,滴加于Sf9细胞液中培养,4~5d后收取活力在60~80%时的细胞培养上清,离心,收获上清,纯化,获得BCoVVLPs。通过免疫小鼠后发现BCoVVLPs中高剂量可诱导机体产生体液免疫与细胞免疫,具有一定的免疫原性,为进一步开发牛冠状病毒新型疫苗提供基础。
主权项:1.一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法,其特征在于,过程包括:1以BCoVS、M、E基因片段重组质粒pFB-S、pFB-M、pFB-E转化至DH10Bac感受态细胞中,获得杆粒DNA,命名为Bac-S、Bac-M、Bac-E;2将步骤1所得Bac-S、Bac-M、Bac-E转染至Sf9细胞液,收集P2代病毒液,得到重组杆状病毒rBac-S、rBac-M、rBac-E;3将步骤2所得重组杆状病毒rBac-S、rBac-M、rBac-E按照1:1.72:0.36的比例进行混合,滴加于Sf9细胞液中培养,4~5d后收取活力在60~80%时的细胞培养上清,离心,收获上清,纯化,获得BCoVVLPs。
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百度查询: 内蒙古农业大学 一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法
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