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一种脂肪间充质干细胞分离方法 

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申请/专利权人:广州沙艾生物科技有限公司

摘要:本发明提供了一种脂肪间充质干细胞分离方法包括以下步骤:1将脂肪组织与脂肪组织消化液混匀后于36.5~37.5℃消化;2加入干细胞无血清培养基终止消化,450~550g离心6~10min;3收集底部细胞加质量浓度为0.8%~1.0%的氯化钠水溶液去除油脂;4弃上清液,加入干细胞无血清培养基重悬,进行细胞培养;5贴壁细胞传代培养,传代至P3~P4代后,干细胞无血清培养基中添加抗生素进行传代培养;培养至P5~P7代后,胰酶替代物消化;6将步骤5处理后的细胞置于2~5℃稳定性保存箱内,光照强度调整为4000~5500Lux,光照6~8小时;7清洗后冷冻储存。本发明脂肪间充质干细胞分离方法细胞分离过程中,细菌感染率小,而且不影响细胞活性,并且细胞冷冻后的存活率高。

主权项:1.一种脂肪间充质干细胞分离方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1将脂肪组织与脂肪组织消化液混匀后于36.5~37.5℃消化;脂肪组织消化液包括胰蛋白酶、胶原蛋白酶Ⅰ、胶原蛋白酶II、胶原蛋白酶IV、分散酶II、弹性蛋白酶;2加入干细胞无血清培养基终止消化,450~550g离心6~10min;3收集底部细胞加质量浓度为0.8%~1.0%的氯化钠水溶液去除油脂;4弃上清液,加入干细胞无血清培养基重悬,进行细胞培养;5贴壁细胞传代培养,传代至P3~P4代后,干细胞无血清培养基中添加抗生素进行传代培养;培养至P5~P7代后,胰酶替代物消化;6将步骤5处理后的细胞置于2~5℃稳定性保存箱内,光照强度调整为4000~5500Lux,光照6~8小时;7清洗后冷冻储存。

全文数据:

权利要求:

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