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申请/专利权人:华南师范大学
摘要:本发明提供一种用于外泌体来源PD‑L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法。包括以下步骤;步骤一、外泌体来源PD‑L1蛋白与抗体的特异性结合;外泌体溶液稀释到适当浓度后,将偶联HRP的抗PD‑L1抗体滴加到外泌体溶液中,孵育30min;步骤二、TSAPSA反应。本发明提供的用于外泌体来源PD‑L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法,通过将已有探针标记的AuNP偶联到TyramineStyramide缀合物上,在H2O2存在的情况下,TyramineStyramide缀合物可以被HRP转化为高活性的氧化中间体,与外泌体蛋白质快速共价结合,实现检测信号的放大,除了不增加非特异性吸附外,该过程还减少了生物分子的消耗,TSAPSA与SERS技术相结合,显著提高了检测的灵敏度。
主权项:1.一种用于外泌体来源PD-L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法,其特征在于,包括以下步骤;步骤一、外泌体来源PD-L1蛋白与抗体的特异性结合;外泌体溶液稀释到适当浓度后,将偶联HRP的抗PD-L1抗体滴加到外泌体溶液中,孵育30min;步骤二、TSAPSA反应;将过氧化氢H2O2修饰后的偶联拉曼探针的纳米金球AuNP@dye-TyramineAuNP@dye-Styramine溶液加入到外泌体溶液中,孵育10min;步骤三、基于Fe3O4@TiO2磁珠的外泌体富集;将外泌体溶液与Fe3O4@TiO2磁珠一起孵育,通过磁铁使Fe3O4@TiO2-外泌体复合物沉淀,去除上清液;步骤四、拉曼信号的采集;将Fe3O4@TiO2-外泌体复合物用PBST溶液洗涤两次后,通过拉曼检测系统采集拉曼信号。
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百度查询: 华南师范大学 一种用于外泌体来源PD-L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法
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