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申请/专利权人:南京华辉天成生物医药有限公司
摘要:本发明属于生物技术领域,涉及一种双酶偶联制备谷胱甘肽和D‑半胱氨酸的方法,该方法以DL‑半胱氨酸为原料,利用双功能谷胱甘肽合成酶GshF突变体和多聚磷酸激酶PPK突变体催化L‑谷氨酸、L‑半胱氨酸和甘氨酸生成谷胱甘肽GSH,反应过程中添加三磷酸腺苷ATP和六偏磷酸钠促进反应进行,反应完成后分离转化产物,得到高纯度谷胱甘肽和D‑半胱氨酸;该方法实现了谷胱甘肽和D‑半胱氨酸的同时生产,具有原料价格低廉,操作简便,转化时间短,生产成本低等优点。
主权项:1.一种双酶偶联制备谷胱甘肽和D-半胱氨酸的方法,其特征在于,所述方法是以含12.0~17.2gL的L-谷氨酸钠、5.4~8.0gL的甘氨酸、14.2~20.6gL的DL-半胱氨酸、1.3~1.8gL的三磷酸腺苷和50~150gL的六偏磷酸钠的缓冲液为反应体系,加入具有谷胱甘肽双功能合成酶突变体活性的基因工程菌细胞A或其粗酶液A和具有多聚磷酸激酶突变体活性的基因工程菌细胞B或其粗酶液B,在pH7~9、30~45℃下反应,催化L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸生产谷胱甘肽,同时制得D-半胱氨酸。
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