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申请/专利权人：上海交通大学;泰兴市东圣生物科技有限公司
摘要：一种木葡糖酸醋杆菌基因组无痕编辑的方法，分别构建一个包含Donor片段的自杀质粒和一个包含归巢核酸内切酶I‑SceI的诱导质粒，依次电转入木葡糖酸醋杆菌的感受态细胞中，经过两次同源重组获得木葡糖酸醋杆菌基因组无痕编辑突变株。本发明实现了对木葡糖酸醋杆菌基因组无痕的敲除、回补、替换和插入操作，可用于BC稳定高产或性能优良菌株的构建工作、便于在食品等行业的应用。
主权项：1.一种木葡糖酸醋杆菌基因组无痕编辑的方法，其特征在于，包括：1构建一个包含Donor片段的自杀质粒和一个包含归巢核酸内切酶I-SceI的诱导质粒；2将自杀质粒电转入木葡糖酸醋杆菌的感受态细胞中，利用细胞自身的同源重组系统，将Donor片段整合至基因组上，获得第一重组突变株；3将诱导质粒电转入第一重组突变株的感受态细胞中，IPTG诱导I-SceI的表达，使其作用于整合在基因组上的I-SceI酶切位点，丢失抗性基因，获得第二重组突变株；4将第二重组突变株在无抗性的HS培养基中传代培养，丢失诱导质粒，获得木葡糖酸醋杆菌基因组无痕编辑突变株。
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权利要求：
百度查询： 上海交通大学 泰兴市东圣生物科技有限公司 木葡糖酸醋杆菌基因组无痕编辑的方法
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