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申请/专利权人：湖南良平生物科技有限公司
摘要：本发明提供一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌在饲料中的应用，将玉米黑粉菌的原生质体加入无菌研钵中，加入适量石英砂，研磨至匀浆状，使用移液枪吸取100μL匀浆涂布在无氮培养基上，放置在28℃培养箱中，待菌落长出后，挑取单菌落纯化培养，保种在15％甘油中备用；将S1中的玉米黑粉菌内生细菌应用于饲料中得到真菌内生密歇根克雷伯氏菌。本发明提供的一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌在饲料中的应用，密歇根克雷伯氏菌能够将豆粕的蛋白含量从28％提高到36％左右，具有显著提高蛋白的作用，其他两种固氮菌也能增加蛋白含量。
主权项：1.一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌在饲料中的应用，其特征在于，包括以下步骤：S1、玉米黑粉菌内生细菌的分离；S11、将玉米黑粉菌接种于YEPSL液体培养基中放置在28℃恒温摇床培养2天，取1mL发酵液转接至新鲜的YEPSL液体培养基中在相同条件下培养12h，取50mL发酵液7000rpm离心10min收集新鲜菌体，弃废液，加入10mL的NaCl重悬菌体并7000rpm离心10min收集菌体，重复此步骤一次，加入20mL裂解液置于28℃孵育3h，然后4000rpm离心10min收集原生质体，并用10mLSTC溶液洗涤两次，最后重悬于2mLSTC溶液中保存备用；S12、将玉米黑粉菌的原生质体加入无菌研钵中，加入适量石英砂，研磨至匀浆状，使用移液枪吸取100μL匀浆涂布在无氮培养基上，放置在28℃培养箱中，待菌落长出后，挑取单菌落纯化培养，保种在15％甘油中备用；S2、将S1中的玉米黑粉菌内生细菌应用于饲料中得到真菌内生密歇根克雷伯氏菌。
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权利要求：
百度查询： 湖南良平生物科技有限公司 一种真菌内生密歇根克雷伯氏菌在饲料中的应用
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