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申请/专利权人:西南林业大学;中国科学院昆明植物研究所
摘要:本发明涉及植物组织培养技术领域。提供一种西印度醋栗的组织培养繁殖方法,该方法包括:以西印度醋栗幼嫩茎尖作为外植体,依次进行初代培养、继代增殖培养、生根培养和炼苗移栽。本发明提供的方法能够有效提高不定芽的成功诱导率,缩短组织培养周期,提高西印度醋栗的增殖系数和生根率,从而提高西印度醋栗的繁殖效率,克服了西印度醋栗传统种苗培育方法中种子萌发率低及种苗繁育速度慢等问题,加快了其在食用及药用方面的开发与利用。
主权项:1.一种西印度醋栗的组织培养繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:1外植体的制备与消毒:采长度为2~3cm的带一对腋芽的幼嫩茎尖为外植体;在保留一部分叶柄的前提下剪除外植体上的叶片,将剪除叶片后的茎尖用洗涤剂水浸泡30~60秒,流水冲洗1~2小时,再用乙醇和升汞溶液消毒,最后用无菌水清洗4~5次;2初代培养:取消毒好的茎尖用无菌纸擦干水分后切去两端0.5cm,将茎尖的芽朝上插入初代培养基中进行不定芽诱导培养,培养温度为25±1℃,光照强度为1000~1500lx,光周期为12小时光照12小时黑暗;培养25天,待诱导出不定芽长成有2~3片叶片的初代苗;3继代增殖培养:从所述初代苗上切离不定芽,将不定芽切成带一对腋芽的2cm小段;将腋芽插入继代增殖培养基中,培养温度为25±1℃,光照强度为1000~1500lx,光周期为12小时光照12小时黑暗;培养25天,待腋芽长至3~4cm高且诱导出新的不定芽小苗,即得到西印度醋栗组培苗;4生根培养:从西印度醋栗组培苗上切离小苗,并将切离的小苗接种到生根培养基上,培养温度为25±1℃,光照强度为1000~1500lx,光周期为12小时光照12小时黑暗;培养30天,待切离的小苗长出4~6根、长2~3cm的粗壮根系,即得到西印度醋栗生根苗;5炼苗移栽:待西印度醋栗生根苗生长至根长3cm,高3~5cm的时,将其移到温室大棚中开瓶炼苗7天,将其从培养瓶中取出,洗净其底部培养基,后移栽至混合基质上培养长成完整的植株。
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