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申请/专利权人:钟明宏
摘要:本发明提供了制备包含至少两个非核苷酸接头的分段核酸和分段核酸的缀合物及其与RNA引导的基因编辑蛋白包括CRISPRCas蛋白和ADAR酶的RNP复合物的工艺和方法,还公开了包含分段核酸或分段核酸缀合物的组合物作为治疗疾病的药剂的用途。
主权项:1.制备由三唑接头连接的分段核酸及其缀合物的方法,包括:a合成长度为8-200碱基的片段1,其3'端含有叠氮基修饰;b合成长度为8-200碱基的片段2,其5'端或靠近5'端的位置含有炔烃,3'端或接近3'端的位置含有氨基;c通过所述叠氮基和炔之间的反应来缀合所述片段1和2以形成通过所得三唑连接的双分段核酸;d将步骤c中的所述双分段核酸的氨基转化为叠氮基;e将d中的叠氮基双分段核酸在所述叠氮基和所述另一片段中的炔基之间缀合,以共价连接另一核酸片段。f可选地,可以根据需要重复步骤d和e,其中步骤e中的所述另一个片段被修饰为含有氨基;g将分段核酸产物与未反应的较短片段和化学试剂分离。
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