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申请/专利权人：广州市新一代生物工程有限公司
摘要：本发明属于生物医药技术领域，公开了一种改进CAR‑NK细胞治疗效果的方法。具体公开了一种CAR‑NK细胞，所述CAR‑NK细胞为在NK细胞表面表达靶向CD19的CAR，所述CAR的结构包括特异性靶向CD19的scFv、来自CD8的铰链、来自CD8跨膜区和CD3ζ联合4‑1BB信号结构域。与现有技术中的CAR‑NK细胞，本发明提供的CAR‑NK细胞表现出更强和更迅速的肿瘤杀伤效果，经过实验证明，该CAR‑NK细胞与靶细胞接触后迅速导致靶细胞膜破裂、胞内物质流出，杀伤肿瘤细胞的平均时间仅需20分钟；在效靶比＝1:5的情况下能达到超过60％的杀伤率。
主权项：1.一种CAR-NK细胞，所述CAR-NK细胞为在NK细胞表面表达靶向CD19的CAR，所述CAR的结构包括特异性靶向CD19的scFv、来自CD8的铰链、来自CD8跨膜区、CD3ζ联合4-1BB信号结构域和EGFP荧光标记；所述NK细胞为NK-92细胞；所述CAR-NK细胞由包括以下步骤的制备方法制备得到：（1）利用慢病毒载体将所述靶向CD19的CAR的序列稳定转染到NK细胞中，得到CAR-NK_Naïve细胞；（2）筛选得到对肿瘤杀伤效果显著的CAR-NK细胞：a）将步骤（1）得到的CAR-NK_Naïve细胞与带DsRed红色荧光的Raji细胞共培养，挑选DsRed红色荧光信号值最低的细胞；b）扩培；c）与带DsRed红色荧光的细胞共培养，挑选DsRed红色荧光信号值最低的细胞；d）重复b）~c）的步骤n次，得到对肿瘤杀伤效果显著的CAR-NK细胞；所述共培养的时间为3~5h，所述CAR-NK_Naïve细胞与Raji细胞的细胞数量比为1:（1~2）；所述筛选的过程所用的时间为6~12个月。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州市新一代生物工程有限公司 一种改进CAR-NK细胞治疗效果的方法
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