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申请/专利权人:天津大学
摘要:本发明公开了一种基于增强表达PRDM1的NK细胞的肿瘤免疫治疗方式,选取了多种手段评估该治疗方式的有效性。该方法包括以下步骤:步骤1,PRDM1过表达慢病毒构建体制备;步骤2,制备增强表达PRDM1的慢病毒颗粒;步骤3,增强表达PRDM1的慢病毒颗粒感染NK细胞;该方法制备得到的增强表达PRDM1的NK细胞显著提升了当今NK细胞治疗恶性肿瘤,尤其是实体肿瘤的疗效,通过提高穿孔素和颗粒酶表达提高NK细胞对靶细胞的杀伤效果,具有更高的敏感性和持续性,能为肿瘤患者的治疗提供有效的帮助。
主权项:1.一种增强表达PRDM1的NK细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,PRDM1过表达慢病毒构建体制备;通过全基因合成或者PCR克隆,得到PRDM1序列;并将该序列通过亚克隆等方式连接至慢病毒表达载体,即PRDM1慢病毒表达质粒;步骤2,制备增强表达PRDM1的慢病毒颗粒将PRDM1慢病毒表达质粒,包装辅助质粒共转染至宿主细胞之中;转染后收集培养上清;离心浓缩病毒,即得到增强表达PRDM1的慢病毒颗粒;步骤3,增强表达PRDM1的慢病毒颗粒感染NK细胞将增强表达PRDM1的慢病毒颗粒加入到NK细胞培养物中,转染后得到增强表达PRDM1的NK细胞;优选的,所述NK细胞为NK92细胞系或外周血单个核细胞、脐带血、诱导多能干细胞、胚胎干细胞或其来源的NK细胞;优选的,为提高转导效率,使用多聚赖氨酸等转染增强剂;感染后12小时离心更换新鲜培养基。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 天津大学 一种增强表达PRDM1的NK细胞制备方法及其应用
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