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申请/专利权人:山东省农业科学院畜牧兽医研究所
摘要:本发明公开了一种PABPC1基因敲除的MDCK细胞系及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPRCas9技术,通过在PABPC1基因的exon2和exon6上下游各设计1个靶点,运用gRNA‑A1和gRNA‑A2将禽流感疫苗生产用细胞系MDCK中的PABPC1基因敲除了5065个碱基,成功构建了PABPC1基因敲除的MDCK细胞系。在PABPC1敲除的MDCK细胞系中,禽流感病毒复制速率明显加快,且PABPC1敲除后对细胞生长速率无显著影响。本发明对提高禽流感疫苗生产效率,降低疫苗生产成本具有重要作用。
主权项:1.一种靶向PABPC1基因的双gRNA组合,其特征在于,包括靶向PABPC1基因的第二外显子的gRNA-A1和靶向PABPC1基因的第六外显子的gRNA-A2;gRNA-A1的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;gRNA-A2的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。
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权利要求:
百度查询: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一种PABPC1基因敲除的MDCK细胞系及其构建方法和应用
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