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申请/专利权人：广东药科大学

摘要：本发明公开了基于主客体相互作用的荧光增强型分子印迹探针可视化检测玉米赤霉烯酮的方法，通过自由基聚合法合成RhB@β‑CDs表面包覆印迹聚合层，以ZnS:Mn@SiO2作为参比信号，通过条件优化，确定了最佳合成和检测条件，其中最佳合成条件为模板分子：功能单体：交联剂=1：5：60。由于RhB@β‑CDs与ZEN之间的相互作用，随着ZEN浓度的增加，468nm处的荧光逐渐增强；在加入参比ZnS:Mn@SiO2后，使可视化效果增强。在最佳检测条件下，玉米赤霉烯酮浓度在0.471‑1.570μM范围内的荧光强度比I468I585有线性关系。实验结果表明，本方法具有对玉米赤霉烯酮的特异识别能力，并成功应用于玉米和薏苡仁等实际样品中微量玉米赤霉烯酮的检测，证明了分子印迹荧光探针在食品和中药材等物质中的毒素检测方面具有巨大潜力。

主权项：1.基于主客体相互作用的荧光增强型分子印迹探针可视化检测玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、RhB@β-CDs的合成1将0.02-0.04gRhB、2.4-4.2gβ-CD、3.2-5.2gDCC和0.15-0.35gDMAP加入到28.0-31.8mLDMF中，在室温条件下搅拌，反应20-30h；2反应结束后，加入两倍体积的去离子水静置一段时间，待沉淀析出后进行过滤，收集沉淀，并用去离子水充分冲洗；3将收集到的沉淀置于55-65℃烘箱中干燥20-30h，即可得到RhB@β-CDs；S2、RhB@β-CDs@MIPs的合成1在装有8.0-12.0mL乙腈溶液的黑盖瓶中加入28.0-32.0mgRhB@β-CDs、3.40-3.70mg丙烯酰胺与80.0-120.0μL的4.0-6.0mgmL玉米赤霉烯酮的甲醇溶液搅拌3.5-4.5h预聚合；2加入100.0-140.0μLEGDMA和5.0-7.0mg偶氮二异丁腈搅拌4h，通入高纯氮气7-12min，置于70-90℃水浴中反应13-20h生成MIPs；3聚合过程结束后，使用索氏提取法以体积比1：1的甲醇乙腈溶液洗涤42-54h去除模板分子和未反应的试剂，直到洗脱液中没有玉米赤霉烯酮的紫外吸收；4将MIPs在55-65℃下干燥12h，获得RhB@β-CDs@MIPs；S3、ZnS:Mn@SiO2的合成1ZnS:Mn的合成：首先，在圆底烧瓶中加入0.565-0.585g的ZnSO4·7H2O，0.028-0.036g的MnCl2·4H2O和70.0-90.0mL的蒸馏水，在氮气保护下搅拌15-25min；然后将8.0-12.0mL摩尔浓度为23.0-28.0mM的Na2S·9H2O水溶液加入到混合物中，继续搅拌30min；离心收集沉淀，用乙醇洗涤三次，放入烘箱烘干备用；2ZnS:Mn@SiO2的合成：称取8.0-12.0mgZnS:Mn放入烧杯中，加入8.0-12.0mL乙醇搅拌25-35min，再加35.0-45.0uLAPTES搅拌10min，随后加35.0-45.0uLTEOS搅拌10min，最后加入35.0-45.0uL的25％氨水，溶液持续搅拌10-15h；反应结束后离心，用水和乙醇交替洗涤，放入55-65°烘箱中10-15h；烘干后粉末配置成1.0mgmLZnS:Mn@SiO2乙腈溶剂备用；S4、玉米赤霉烯酮的荧光测定1称取15.0-25.0mgRhB@β-CDs@MIPs加入到15.0-25.0mL甲醇中作为储备原液，吸取0.85-0.95mLRhB@β-CDs@MIPs储备液加入到2.0mL离心管中，分别加入不同体积的15.70mM玉米赤霉烯酮；2用甲醇将混合溶液稀释至0.95-1.00mL；3加入1.0mgmLZnS:Mn@SiO2溶液25.0-35.0μL，并计算出最终玉米赤霉烯酮浓度；4用相机或手机在波长250-260nm的紫外灯照射下拍摄加入不同浓度玉米赤霉烯酮样品溶液的照片，记录荧光颜色的变化。

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