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申请/专利权人:温州医科大学附属第一医院
摘要:本方案提供一种促进创面愈合的乳酸杆菌生物膜衍生物制备方法,包括以下步骤:S1:乳酸杆菌复苏与培养;S2:制备模型;获得表面具有均匀孔洞结构的多孔粗糙表面的模型;S3:乳酸杆菌接种与生物膜制备;S4:去除乳酸杆菌活菌菌体,得到无菌的生物膜衍生物滤液,即乳酸杆菌生物膜衍生物。本发明用一种具有均匀孔洞结构的多孔粗糙的微表面模具来培养乳酸杆菌生物膜,帮助其扩大产量,有利于生物膜的大规模生产。提取出的乳酸杆菌生物膜衍生物保留了乳酸杆菌生物膜中的活性成分,引入并采用了“无细菌的生物膜衍生物”这一新型的益生菌递药系统概念,在糖尿病创面再生领域中具有非常有利的促进作用。
主权项:1.一种促进创面愈合的乳酸杆菌生物膜衍生物制备方法,其特征在于:包括以下步骤:S1:乳酸杆菌复苏与培养:采用无菌的MRS培养基培养乳酸杆菌,将置于厌氧培养袋中的细胞于37℃细菌培养箱中进行厌氧培养24h,经多次传代培养至细菌性状稳定;S2:制备模型:将已充分超声分散的20%的二氧化硅-乙醇悬液均匀平铺于载玻片上,风干制得SiO2粒子模板;采用聚苯乙烯的甲苯溶液作为填充物填充于SiO2粒子模板间隙,并风干;以10%氢氟酸溶液充分刻蚀SiO2粒子模板,纯水洗去表面残留酸液后,获得表面具有均匀孔洞结构的多孔粗糙表面的模型;S3:乳酸杆菌接种与生物膜制备:将性状稳定的乳酸杆菌按1%的接种量接种于已灭菌的多孔粗糙模型表面,厌氧培养24h;去除多余的培养基后,于薄膜表面留下一层白色膜状物,即为乳酸杆菌生物膜;S4:去除乳酸杆菌活菌菌体:收集多孔粗糙模型表面形成的乳酸杆菌生物膜,用1×PBS缓冲液清洗至洗涤液呈现无色澄清的状态,超声分离乳酸杆菌与其活性分泌物,超声后的混合液经孔径为0.45μm的过滤器过滤,得到无菌的生物膜衍生物滤液,即乳酸杆菌生物膜衍生物。
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百度查询: 温州医科大学附属第一医院 一种促进创面愈合的乳酸杆菌生物膜衍生物及其制备方法和应用
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