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申请/专利权人:中国药科大学
摘要:本发明公开了一种利用同源靶向增强的生物膜囊泡检测循环肿瘤细胞的方法,该方法先取肿瘤细胞制备得到生物膜囊泡,然后采用5‑氨基乙酰丙酸己酯盐酸盐和金属配合物TDA‑Co‑Ln对生物膜囊泡进行修饰得到靶向增强的生物膜囊泡,该靶向增强的生物膜囊泡具有增强的同源靶向能力,可将HAL高效靶向递送到血液中的循环肿瘤细胞中;之后通过超声破碎释放捕获的目标循环肿瘤细胞,释放HAL到106个肿瘤细胞中,进而在肿瘤细胞内经血红素生物合成途径产生PpIX堆积,使103‑104个肿瘤细胞发出红色荧光信号,进而利用流式细胞仪检测肿瘤细胞的荧光信号,并计算得到血液中目标CTC的数量。
主权项:1.一种检测循环肿瘤细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,取肿瘤细胞,制备生物膜囊泡;步骤2,取生物膜囊泡溶液,加入5-氨基乙酰丙酸己酯盐酸盐溶液,混匀后再加入金属配合物TDA-Co-Ln溶液,室温孵育后离心,得到靶向增强生物膜囊泡;步骤3,取靶向增强生物膜囊泡溶液,加入同源肿瘤细胞悬液外周血单个核细胞悬液和金属配合物TDA-Co-Ln溶液,孵育后离心,对沉淀进行超声破碎,将其中的HAL释放,之后与同源肿瘤细胞孵育,通过流式细胞仪检测产生PpIX荧光的肿瘤细胞的荧光信号,代入所建立的标准曲线中计算得到循环肿瘤细胞的个数;所述金属配合物TDA-Co-Ln由2,2’-硫代二乙酸、钴离子Co2+和镧系离子制成,所述镧系离子为Eu3+或Tb3+。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国药科大学 一种同源靶向增强的生物膜囊泡用于循环肿瘤细胞的流式细胞仪检测方法
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