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分离、测定那屈肝素钙中的寡糖并建立质谱库的方法 

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申请/专利权人:重庆伊诺生化制品有限公司

摘要:本发明属于化学分析技术领域,具体涉及一种分离、测定那屈肝素钙中的寡糖并建立质谱库的方法。本发明利用UPLC‑QTOF‑MS法分离测定那屈肝素钙,获得那屈肝素钙经肝素酶酶解前后的指纹图谱;然后结合那屈肝素钙的通式,并根据酶解反应的特性,建立起结构清晰、分子式明确的质谱库;用UNIFI软件将获得的指纹图谱与质谱库进行比对,完成了那屈肝素钙全碳链糖谱和经酶解之后的寡糖片段的质谱数据检索和归属。本发明所提供的检测方法和质谱库,对那屈肝素钙的药物安全和质量控制具有重要意义。

主权项:1.基于UPLC-QTOF-MS法分离那屈肝素钙中寡糖组分和或寡糖片段的方法,其特征在于,所述方法包括:1分离那屈肝素钙中寡糖组分的Top-down法;所述Top-down法是通过如下梯度洗脱程序分离那屈肝素钙中的寡糖:0-40min,设置所述流动相A的体积分数为10%-35%,所述流动相B的体积分数为90%-65%,洗脱方式为梯度洗脱;40.01-55min,设置所述流动相A的体积分数为90,所述流动相B的体积分数为10%,洗脱方式为等度洗脱;55.01-70min,设置所述流动相A的体积分数为10%,所述流动相B的体积分数为90%,洗脱方式为等度洗脱;和或2分离那屈肝素钙中寡糖片段的Bottom-up法;所述Bottom-up法是采用如下梯度洗脱程序分离那屈肝素钙中肝素酶酶解的寡糖片段:0-10min,设置所述流动相A的体积分数为10%-35%,所述流动相B的体积分数为90%-65%,洗脱方式为梯度洗脱;10.01-25min,设置所述流动相A的体积分数为90%,所述流动相B的体积分数为10%,洗脱方式为等度洗脱;25.01-40min,设置所述流动相A的体积分数为10%,所述流动相B的体积分数为90%,洗脱方式为等度洗脱;所述Top-down法和Bottom-up法均以乙酸铵溶液为流动相A,乙酸铵溶液和乙腈的混合溶液作为流动相B,所述流动相B中,乙酸铵溶液和乙腈的体积比1:15-25。

全文数据:

权利要求:

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