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申请/专利权人:上海中医药大学
摘要:本发明属于生物医药领域,具体涉及一种利用人工修饰3D光交联探针,在纳米微球表面修饰引发剂,加入单体,通过原子转移自由基聚合反应ATRP在纳米微球上合成不同数量的、有一定长度的链,从而形成3D结构,能够增加小分子的固定位点,从而增强钓取蛋白靶点的成功率,更加准确地确定靶标蛋白。进一步连接光交联官能团,使之能与活性小分子连接,用于钓取中草药活性小分子合成酶。本发明可以实现在复杂的蛋白背景中,鉴别中草药活性小分子未知的蛋白靶点,为最终实现中药活性分子的微生物合成奠定坚实的基础。
主权项:1.一种人工修饰3D光交联探针的制备方法,其特征在于,所述的人工修饰3D光交联探针以纳米微球为基体,修饰有以下基团: 其中R为光交联官能团,选自二苯甲酮、芳基叠氮化物或双吖丙啶基团;m=2-15,n=2-15;制备方法包括以下步骤:A.在修饰有羧基类末端的纳米微球上通过酰胺缩合连接乙二胺;所述的羧基类末端为羧基、羧甲基或羧基甲氧基;B.步骤A产物与卤代异丁酸进行酰胺缩合反应,将引发剂基团-NH-CO-CCH22X修饰在纳米微球上,得到带有引发剂的纳米微球;X为Cl或Br;C.带有引发剂的纳米微球与化合物羟基丙烯酸酯、聚乙二醇烯类单体进行表面聚合反应,得到带有羟基末端的3D材料,是修饰的纳米微球;m=2-15,n=2-15;D.将步骤C带有羟基末端的3D材料与丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶反应,将羧基连接到3D材料上,得到修饰的纳米微球;E.活化步骤D产物的羧基,再与光交联剂反应,最终得到人工修饰的3D光交联探针;所述的光交联剂选自二苯甲酮、芳基叠氮化物或双吖丙啶类化合物。
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百度查询: 上海中医药大学 一种人工修饰3D光交联探针及钓取中草药活性小分子合成酶的方法
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