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一种诱导人类多能干细胞定向分化为成釉细胞的培养基及培养方法 

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申请/专利权人:广州医科大学附属口腔医院(广州医科大学羊城医院)

摘要:本申请属于培养基开发及应用领域,具体涉及一种诱导人类多能干细胞定向分化为成釉细胞的培养基及培养方法。本申请基于成釉细胞发育学原理,提供一种诱导人类多能干细胞定向分化为成釉细胞的培养基,利用成分明确的生物分子诱导HPSCs依次分化为表面外胚层细胞、牙上皮细胞、成釉细胞;所诱导的成釉细胞不仅表达成釉标志物,而且具有细胞极化形态,是首次在体外诱导HPSCs分化为极化状态的成釉细胞,与体内表型相一致,可用于大批量再生成釉细胞。本申请诱导效果稳定可靠,诱导成分明确,HPSCs定向成釉细胞分化效果稳定,重复性好。

主权项:1.一种诱导人类多能干细胞定向分化为成釉细胞的培养基,其特征在于,由培养基I、培养基II和培养基III组成;所述培养基I由DMEMF12培养基、15vv%~20vv%敲除血清替代品、1.5mM~2.5mML-谷氨酰胺、0.8×10-4M~1.2×10-4M非必需氨基酸、0.5vv%~1.0vv%青霉素-链霉素双抗、10μM~20μMSB431542和10ngmL~25ngmLBMP4蛋白组成;所述培养基II由DMEMF12培养基、15ngmL~25ngmL表皮生长因子、20ngmL~30ngmL碱性成纤维生长因子、1.0vv%~2.0vv%B27添加剂、0.5vv%~1.0vv%青霉素-链霉素双抗、10ngmL~25ngmLBMP4蛋白、0.5μM~1.0μM视黄酸和18mM~22mM氯化锂组成;所述培养基III由DMEMF12基础培养基、8vv%~12vv%胎牛血清、10mM~20mMβ-甘油磷酸钠、45μgmL~55μgmL维生素C、1.5mM~2.5mM氯化钙、0.5vv%~1.0vv%青霉素-链霉素双抗、8ngmL~12ngmL表皮生长因子、2.5ngmL~3.5ngmL转化生长因子β1和14mM~16mM氯化锂组成。

全文数据:

权利要求:

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