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申请/专利权人:毕节市农投菌业科技有限责任公司
摘要:一种快速获取白参菌PCR产物的方法,以白参菌的子实体作为原料,在冰浴下研磨预处理制备子实体上清液,采用2xT5DirectPCRMixPlant试剂盒对子实体上清液进行PCR反应,所述PCR反应具体是先进行预变性、然后进入变性、退火和延伸的循环中,循环结束后进行终延伸,循环中退火温度控制为56℃,退火时间为10s。本发明通过采用特定的白参菌子实体作为原料,再以特定的2xT5DirectPCRMixPlant试剂盒进行质扩获取PCR产物,方法较现有技术简单、高效,获取白参菌PCR产物的纯度和浓度高,ITS鉴定时间缩短一半,为后续分子鉴定工作、基因检测、寻找特异性片段等工作提高了准确性和高效性。
主权项:1.一种快速获取白参菌PCR产物的方法,其特征在于:以白参菌的子实体作为原料,在冰浴下研磨预处理制备子实体上清液,采用2xT5DirectPCRMixPlant试剂盒对子实体上清液进行PCR反应,所述PCR反应具体是先进行预变性、然后进入变性、退火和延伸的循环中,循环结束后进行终延伸,循环所述循环过程中变性温度为98℃,时间为10s,退火温度控制为56℃,退火时间为10s,延伸温度为72℃、时间为20-30s,所述白参菌子实体研磨预处理的冰浴温度为-20℃,研磨时间为2min,研磨结束后,取1研磨后的白参菌子实体浸于ddH2O中,上下颠倒混匀后,简短离心,研磨后的白参菌子实体与ddH2O的质量体积比为1mg:5uL。
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