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摘要：本发明提供了一种美洲柿组培体系建立的方法，该方法包括外植体消毒处理、初代培养、增殖培养、生根培养和移栽。本发明不定芽诱导率高，叶片数目多、面积大，长势好，根系生长健壮，明显缩短了美洲柿的生长周期，为以后组织快繁和砧木苗培育，也为遗传转化和基因编辑提供侵染材料。

主权项：1.一种美洲柿组培体系建立的方法，其特征在于，该方法为：S1、外植体消毒处理：以美洲柿DiospyrosvirginianaL种子未成熟胚为外植体，将美洲柿种子外果肉去除干净，晾干后，在清水中浸泡洗净种子表面的一层白色薄膜，用流水冲洗至少30min，然后用质量分数为75％的乙醇溶液浸泡30s，再用质量分数为0.1％的HgCl2溶液浸泡10min，再无菌水冲洗3～5次，最后用滤纸吸净种子表面水分，取出种胚，得到外植体；S2、初代培养：将S1中得到的种胚接种在初代培养基上进行初代培养50d，得到初代培养的健壮幼苗；所述初代培养基是由12NMS1中加入以下终质量浓度的原料而成：ZT0.44mgL、IBA0.3mgL；所述12NMS1由12NMS基础培养基加入以下终质量浓度的原料并用NaOH调节pH值至5.8而成：碳3gL、蔗糖70gL和琼脂7gL；S3、增殖培养：将S2中得到的初代培养的健壮幼苗切除根部，留2cm～3cm上部茎段接种到增殖培养基上进行增殖培养30d，进行愈伤组织及不定芽的诱导，得到增殖培养的美洲柿健壮组培苗；所述增殖培养基由12NMS2中加入终浓度为0.1gL的混合碱性盐而成；所述混合碱性盐中Na2CO3和NaHCO3的质量比为1:1；所述12NMS2由12NMS基础培养基加入以下终质量浓度的原料并用NaOH调节pH值至5.8而成：ZT1mgL、IAA0.1mgL、蔗糖30gL和琼脂7gL；S4、生根培养：切取2cm～3cm的S3中得到的增殖培养的美洲柿健壮组培苗，在200mgL的IBA溶液中浸泡10min后，用无菌滤纸吸掉多余的IBA溶液，接种在不含植物生长调节剂的生根培养基中，暗培养3d后转光照生根培养30d，得到生根后的组培苗；所述生根培养基由12NMS基础培养基加入以下终质量浓度的原料并用NaOH调节pH值至5.8而成：蔗糖30gL和琼脂7gL；S5、移栽：将S4中得到的生根后的组培苗在组培室开盖培养3天，用无菌水清洗根部的培养基，移栽到灭菌过的混合基质中，在人工气候箱培养40天，移栽到花盆中；所述混合基质由质量比为10:1的草炭土和珍珠岩组成。

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