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一种胎盘羊膜间充质干细胞分离提取方法及其在产后恢复中的应用 

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摘要:本发明提供了一种胎盘羊膜间充质干细胞分离提取方法及其在产后恢复中的应用,所述提取方法包括以下步骤:(1)将胎盘放置在处理盘中,将羊膜沿脐带和胎盘连接处从胎盘上剥离,清洗;(2)将清洗后的羊膜组织放入试管中加入I型和II胶原酶、磷酸盐缓冲液组成的混合物,处理;(3)继续将处理过的羊膜组织加入胶原酶I、DNaseI和生理盐水,消化;(4)震荡消化后,离心,弃上清,得到离心后的细胞;(5)离心后的细胞加入新鲜培养基中,在CO2培养箱中培养。本发明提出的提取方法和提取专用培养基能在较小损伤干细胞的情况下,快速获得胎盘羊膜间充质干细胞。干细胞纯度高,具有较高的增殖和分化能力,可以应用于产后恢复中。

主权项:1.一种胎盘羊膜间充质干细胞分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将胎盘放置在处理盘中,将羊膜沿脐带和胎盘连接处从胎盘上剥离,用清洗液清洗2-4次,再用体积分数75%的酒精漂洗2-4次;(2)将漂洗过的羊膜剪碎至1-2cm2的羊膜组织,再用清洗液清洗2-3次,将清洗后的羊膜组织放入试管中加入I型和II胶原酶、磷酸盐缓冲液组成的混合物,在35-36℃处理30-40分钟;(3)继续将处理过的羊膜组织用清洗液清洗2-4次,加入胶原酶I、DNaseI和生理盐水,在35-36℃下160-180rpm震荡消化30-40分钟;(4)震荡消化后,加入生理盐水,在35-36℃温度下1400-1500rpm离心5-10分钟,弃上清,得到离心后的细胞;(5)离心后的细胞加入新鲜培养基中,在CO2培养箱中培养。

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