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摘要：本发明属于基因工程及分子生物学领域，具体涉及一种咖啡树谷氨酸脱羧酶基因克隆和原核表达方法以及GABA制备方法。本发明首先获得Cagad，序列如SEQIDNO.1所示；然后进行平末端加A处理，得到T克隆载体连接体系，转化至E.coliTOP10中，获得的重组T克隆载体细菌；并设计带有酶切位点的引物克隆Cagad，构建重组载体，导入至大肠杆菌感受态细菌中，获得表达CaGAD的重组菌株；最后利用IPTG对重组菌株进行诱导表达，并通过镍柱亲和层析法进行纯化，得到纯化蛋白，进而制备获得GABA。本发明实现了CaGAD重组蛋白的体外可溶性表达，在食品和医药等领域具有良好的应用前景。
主权项：1.一种Cagad，其特征在于，所述Cagad的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
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百度查询： 江苏大学 一种咖啡树谷氨酸脱羧酶基因克隆和原核表达方法以及GABA制备方法
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