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摘要：本发明涉及一种基于免疫沉淀技术富集DNA甲基化片段的方法。本发明通过优化磁珠‑抗体‑核酸结合环境以及添加适量的修饰λDNA作为DNA甲基化保护剂，采用竞争性结合的方式，减少由于抗体自身原因所带来的非特异性结合，优化洗涤步骤，采用不同盐离子浓度梯度洗涤磁珠抗体核酸结合物，降低非特异性富集，有效提高了甲基化基因的结合效率。
主权项：1.一种基于免疫沉淀技术富集DNA甲基化片段的方法，包括如下步骤：S1.向待测样本中添加λDNA作为DNA甲基化保护剂，得到添加λDNA的样本；S2.将免疫沉淀缓冲液和添加λDNA的样本混合后90-95℃孵育5-20min，结束后迅速冷却，得到混合液；S3.将抗体和磁珠加入到步骤S2得到的混合液中，2-8℃孵育4-16个小时；S4.瞬时离心后置于预冷的磁力架上，弃掉上清液；使用洗涤液清洗磁珠；S5.用洗脱液洗脱DNA，条件为50-60℃15min，95-100℃15min。
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百度查询： 浙江默乐生物科技有限公司 江苏默乐生物科技股份有限公司 一种基于免疫沉淀技术富集DNA甲基化片段的方法
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