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摘要：本发明涉及一种大气环境微生物基因组DNA提取方法；利用石英纤维滤膜进行大气颗粒物的采集，通过离心充分洗脱采集到的颗粒物，得到洗脱液；向装有石英滤膜的离心管中再次加入缓冲液，进行大气颗粒物的二次洗脱，得到二次洗脱液；将两次得到的洗脱液过滤，洗脱后的石英滤膜放置于注射器中，用针管活塞充分挤压石英采样膜，将已经富集了大气颗粒物的聚醚砜滤膜剪碎后转移至裂解管中加入裂解液；在洗脱DNA时通过加热吸附柱进行热脱附，提取滤膜上的大气微生物基因组DNA，通过琼脂糖凝胶电泳直观检测DNA，通过超微量分光光度计检测DNA浓度和纯度。所获得的DNA满足大气微生物宏基因组学研究的实验要求，可以直接进行宏基因组实验的DNA片段化、建库和测序。
主权项：1.一种大气环境微生物基因组DNA提取方法；其特征是，包括如下步骤：1利用石英滤膜进行大气颗粒物的采集，而后将石英滤膜贴壁放置于无菌无酶离心管中，加入缓冲液先进行冰浴超声，然后通过离心充分洗脱采集到的颗粒物，得到洗脱液；2将洗脱液转移至新的离心管中保存，向装有石英滤膜的离心管中再次加入缓冲液，冰浴超声，进行大气颗粒物的二次洗脱，得到二次洗脱液；3将两次得到的洗脱液过滤到孔径为0.22μm聚醚砜滤膜上，在过滤过程中将洗脱后的石英滤膜放置于注射器中，用针管活塞充分挤压石英采样膜，至无洗脱液从注射器中滴落，将这部分洗脱液也过滤至聚醚砜滤膜上；4将已经富集了大气颗粒物的聚醚砜滤膜剪碎后转移至裂解管中，加入裂解液，以2500–2800转分的转速高速震荡裂解后进行加热，在洗脱DNA时通过加热吸附柱进行热脱附，提取滤膜上的大气微生物基因组DNA，通过琼脂糖凝胶电泳直观检测DNA，通过超微量分光光度计检测DNA浓度和纯度。
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百度查询： 天津大学 一种大气环境微生物基因组DNA提取方法
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