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一种新型T细胞功能检测方法 

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摘要:本发明适用于医学检测技术领域,提供了一种新型T细胞功能检测方法,包括如下步骤,首先创建TCR刺激和CD28共刺激的T细胞激活双信号模型,采用基因转染表达共同刺激分子CD80或CD86后,流式细胞术定量测定比对CD80与CD86共同刺激与T细胞激活之间的关系,并通过抗体磁珠分选来区分幼稚与记忆T细胞对共同刺激的依赖度;建立Treg抑制和CTLA‑4转内吞模型,并进行激光共聚焦显微检测,以研究Treg对T细胞激活的负向调控作用;通过ABC磁珠染色等方法检测免疫细胞上特异标志物,进行定量可控的T细胞激活和Treg功能试验,来检测T细胞激活是否异常。本发明为类风湿关节炎等自身免疫性疾病早期诊断提供理论依据和实验新资料。

主权项:1.一种用于非诊断目的的T细胞功能检测方法,其特征在于:包括:S1:在对I型糖尿病患者、类风湿关节炎患者及健康对照者的血液样本采集并适当分组后,首先创建TCR刺激和CD28共刺激的T细胞激活双信号模型;S2:采用基因转染表达共同刺激分子CD80或CD86后,流式细胞术定量测定比对CD80与CD86共同刺激与T细胞激活之间的关系,并通过抗体磁珠分选来区分幼稚与记忆T细胞对共同刺激的依赖度;S3:建立Treg抑制和CTLA-4转内吞模型,并进行激光共聚焦显微检测,以研究Treg对T细胞激活的负向调控作用;S4:通过ABC磁珠染色等方法检测免疫细胞上特异标志物,进行定量可控的T细胞激活和Treg功能试验,来检测T细胞激活是否异常;S4的T细胞检测步骤如下:S401:流式细胞染色荧光ABC磁珠蛋白表达定量;S402:T细胞亚群磁珠分选和纯化;S403:T细胞无抗原共同刺激试验;S404:T细胞有抗原共同刺激试验;S405:Treg负向免疫调节试验;S406:T细胞转内吞试验。

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权利要求:

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