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摘要：本发明公开了一种用于细菌识别、捕获与杀菌的适配体荧光传感方法，包括：制备AIECuNCs溶液，并对AIECuNCs溶液进行多粘菌素E修饰，获得多粘菌素EPME修饰后的AIECuNCs；培养细菌，并制备适配体功能化的磁珠；将标记有大肠杆菌适配体的链霉亲和素化的磁珠连结PME@AIECuNCs识别并捕获大肠杆菌，获得IMB@Apt‑EE.coliPME@AIECuNCs三明治结构；通过紫外灯照射使适配体中的光控基团PC‑linker断裂，磁性分离后取上清液，采用荧光光谱仪测荧光强度，实现对细菌的识别捕获。本发明提高了细菌检测的灵敏度和选择性，实现了对细菌的即时杀灭。

主权项：1.一种用于细菌识别、捕获与杀菌的适配体荧光传感方法，其特征在于，所述方法用于非疾病诊断与治疗的目的，包括：制备AIECuNCs溶液，并对所述AIECuNCs溶液进行多粘菌素E修饰，获得多粘菌素E修饰后的AIECuNCs；培养细菌，并制备适配体功能化的磁珠；将标记有大肠杆菌适配体的链霉亲和素化的磁珠连结PME@AIECuNCs识别并捕获大肠杆菌，获得IMB@Apt-EE.coliPME@AIECuNCs三明治结构；通过紫外灯照射使适配体中的光控基团PC-linker断裂，磁性分离后取上清液，采用荧光光谱仪测荧光强度，实现对细菌的识别捕获；所述制备AIECuNCs溶液的过程包括：在室温磁力搅拌下，将无水CuSO4溶液加入到2.4mL超纯水中，充分混匀后，再添加GSH溶液；转移至37℃水浴条件下磁力搅拌30min，随后用1M的NaOH溶液将体系的pH调至4.0～5.5；将反应溶液在37℃条件下剧烈搅拌1h，制备获得CuNCs溶液；将CeNO33·6H2O溶液加入到所述CuNCs溶液，定容后于室温条件下搅拌10min；再用MW＝500Da的透析袋透析1h，制得所述AIECuNCs溶液；所述无水CuSO4溶液和GSH溶液的摩尔比为8:1；所述pH的范围为4.6～4.7；所述CeNO33·6H2O溶液的用量为20mM的溶液50μL；对所述AIECuNCs溶液进行多粘菌素E修饰，获得多粘菌素E修饰后的AIECuNCs的过程包括：在CuNCs中加入多粘菌素E和硝酸铈溶液，用水定容至8mL后进行磁力搅拌，制得多粘菌素E修饰的AIECuNCs；所述CuNCs的用量为1.6mL；所述多粘菌素E的用量为2.4mL4mgmL，用水定容至8mL后，剧烈搅拌1h；所述培养细菌的过程包括：将细菌菌落置于10mLLB液体培养基中，随后将细菌置于37℃的恒温振荡器中，以180rpm的速度培养过夜；所述细菌包括大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌；制备适配体功能化的磁珠的过程包括：将生物素和光控基团PC-linker标记的大肠杆菌适配体Apt-E与链霉亲和素标记的磁珠在27℃下反应1h，随后，用PBS缓冲溶液洗两次后，进行磁性分离，制得适配体功能化的磁珠IMB@Apt-E；将标记有大肠杆菌适配体的链霉亲和素化的磁珠连结PME@AIECuNCs识别并捕获大肠杆菌，获得IMB@Apt-EE.coliPME@AIECuNCs三明治结构的过程包括：将磁珠IMB@Apt-E与不同浓度的细菌液混匀，并用1×PBS定容至1mL，振荡孵育，磁性分离以后用Tri-HCl清洗2次，弃去上清液以洗去游离的细菌液；向溶液中分别加入多粘菌素E修饰的AIECuNCs，在27℃条件下振荡孵育1.5h形成IMB@Apt-EE.coliPME@AIECuNCs三明治结构；所述细菌液的浓度为：108～102CFUmL；所述振荡孵育的温度和时间分别对应为27℃、1h；所述Tri-HCl缓冲含有NaCl和MgCl2且pH＝7.20；所述紫外灯为365nm的紫外灯，照射时间为4min。

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