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申请/专利权人：中国医学科学院药物研究所
申请日：2023-07-17
公开（公告）日：2025-01-17
公开（公告）号：CN119320756A
专利技术分类：.转移酶（2.）（核糖核酸酶入C12N9/22）[2006.01]
专利摘要：本发明属于基因技术和药学领域，公开了一种高效表达的人源HomosapiensPARP‑2催化域突变体蛋白及其应用。通过对人源和鼠源Musmusculus的PARP‑2催化结构域进行序列比对，设计突变体。通过差示扫描荧光法DifferentialScanningFluorimetry测定出突变体catPARP‑2SE核酸序列密码子优化并突变349TELQSP354为349SERQGL354的Tm值提高约1.11℃。相比于野生型，该突变体增强了热稳定性，并在Escherichiacoli系统中表达量提高四倍以上，有利于开展PARP抑制剂的酶学水平活性评价和蛋白结晶实验。蛋白结晶温度从4℃提高到了25℃，极大地降低了获得蛋白‑配体复合物结构的难度，有助于开展基于蛋白结构的PARP‑2抑制剂设计。catPARP‑2SE的高表达量和在接近于室温的环境下结晶两种特征，可应用于发现PARP‑2选择性非选择性抑制剂或PARP家族其它亚型选择性抑制剂。
专利权项：1.一种人源PARP-2催化域突变体蛋白，其特征在于，所述的人源PARP-2催化域是野生型PARP-2的全长氨基酸序列中的催化域部分，所述的人源PARP-2催化域突变体蛋白是将人源PARP-2催化域的氨基酸序列突变形成的突变体蛋白；所述的氨基酸序列突变是按照野生型PARP-2的全长氨基酸序列349位至354位苏氨酸、谷氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、脯氨酸分别突变为丝氨酸、谷氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、亮氨酸得到的氨基酸序列；所述的野生型PARP-2的全长氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述的野生型PARP-2的催化域部分的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
百度查询： 中国医学科学院药物研究所 一种Escherichia coli系统中高效表达的人源PARP-2催化域突变体
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