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着陆垫细胞系的生成专利

发布时间:2025-01-21 13:31:57 来源:龙图腾网 导航: 龙图腾网> 最新专利技术> 着陆垫细胞系的生成

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申请/专利权人:百时美施贵宝公司

申请日:2022-12-28

公开(公告)日:2025-01-17

公开(公告)号:CN119325508A

专利技术分类:..分离、制备或纯化DNA或RNA的方法(DNA或RNA的化学制备入C07H21/00;自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34)[2006.01]

专利摘要:本公开文本提供了生成用于靶向基因整合的着陆垫细胞的方法,所述方法包括例如使用同源重组将着陆垫质粒在靶向整合位点处整合至亲本细胞的基因组中。在一方面,两个位点特异性重组位点SSRS位于多核苷酸序列的侧翼;并且两个同源重组位点位于关于所述SSRS的5’和3’末端。所述着陆垫质粒的两个同源重组位点能与所述亲本质粒上的对应同源重组位点重组,从而将所述着陆垫质粒整合在所述亲本质粒内的内部位置处。所公开的所述方法允许通过在热细胞系中鉴定用于靶向整合的热点来生成高表达细胞系。本公开文本还提供了用于生成本公开文本的着陆垫细胞的细胞以及包含用于生成本公开文本的着陆垫细胞的细胞和或试剂的试剂盒。还提供了用于靶向整合的新颖热点。

专利权项:1.一种用于选择适合于开发着陆垫细胞系的亲本细胞的方法,所述方法包括:i筛选并且选择具有目的基因GOI的高表达滴度的细胞系;以及ii进一步筛选i的细胞并且选择具有低拷贝数的包含编码所述GOI的核酸的亲本质粒的细胞,其中所述拷贝数是一或二。

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