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恭喜安徽大学王喜庆获国家专利权

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龙图腾网恭喜安徽大学申请的专利一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ-内酯制备中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117467631B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311303268.8,技术领域涉及:C12N9/08;该发明授权一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ-内酯制备中的应用是由王喜庆;王帅宁;房伟;肖亚中设计研发完成,并于2023-10-10向国家知识产权局提交的专利申请。

一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ-内酯制备中的应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ‑内酯制备中的应用,其中脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体是由野生型P450BSβ的氨基酸序列在第78位、85位、173位和290位突变得到的,可以利过氧化氢为直接的电子供体,脂肪酸为底物直接一步氧化内酯化为内酯。催化的底物范围扩展为链长为C6~C18链长的脂肪酸,含官能团的脂肪酸,含芳香杂环的脂肪酸。本发明所述的催化剂效率更高、反应更简洁、底物范围更广,在制备γ‑内酯方面具有良好的应用前景和工业价值。

本发明授权一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ-内酯制备中的应用在权利要求书中公布了:1.一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体,其特征在于通过包括如下步骤的方法制备获得:步骤1:构建表达脂肪酸脱羧酶P450BSβ的质粒将SEQIDNO:2所示的核苷酸序列经酶切重组到表达载体pET28a上;步骤2:将步骤1构建的表达脂肪酸脱羧酶P450BSβ的质粒转化到大肠杆菌中;步骤3:脂肪酸脱羧酶P450BSβ的表达将步骤2得到的菌种在LB液体培养基中过夜培养,然后加入TB液体培养基中扩培,于对数期后期加入血红素前体δ-氨基乙酰丙酸和IPTG诱导表达后,离心收菌;步骤4:含有脂肪酸脱羧酶P450BSβ的细胞裂解液的制备用缓冲液将步骤3得到的菌体重悬,通过超声破碎裂解细胞,离心,获得上清液;步骤5:脂肪酸脱羧酶P450BSβ的纯化将步骤4获得的上清液加入事先预处理的镍离子亲和柱,使带有His标签的目的蛋白与镍柱结合,然后于较低咪唑浓度下除去杂蛋白,最后用含有高浓度咪唑的缓冲液将目的蛋白洗脱;步骤6:将洗脱下来的目的蛋白透析以除去咪唑,蛋白经浓缩后冻干制成冻干粉,测定目的蛋白浓度后,-80℃保存。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人安徽大学,其通讯地址为:230601 安徽省合肥市经济技术开发区九龙路111号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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