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恭喜郑州思昆生物工程有限公司王亚文获国家专利权

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龙图腾网恭喜郑州思昆生物工程有限公司申请的专利一种固定化模板多核苷酸配对末端测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115029424B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110234085.X,技术领域涉及:C12Q1/6869;该发明授权一种固定化模板多核苷酸配对末端测序方法是由王亚文;王玲玲;孙洁设计研发完成,并于2021-03-03向国家知识产权局提交的专利申请。

一种固定化模板多核苷酸配对末端测序方法在说明书摘要公布了:本发明涉及基因测序技术领域,具体涉及一种固定化模板多核苷酸配对末端测序方法。本发明方法中第一端测序模板链固定化在芯片上,通过将第一端测序模板链的互补链直接连接在其3’端的方式,将互补链间接固定在芯片上,解除第一端测序模板链与互补链之间的双链结构,通过封堵第一端测序模板链的方式,避免互补链在复性环境与第一端测序模板链再杂交结合,进而实现以互补链为模板进行第二端测序。整个测序方法的第二端测序的模板链直接连接在第一端测序模板链的位置,克服了传统双末端测序方法第二端测序重新成簇造成的簇有序性降低、簇范围变大等导致的测序信号稳定性差等技术缺陷。

本发明授权一种固定化模板多核苷酸配对末端测序方法在权利要求书中公布了:1.一种固定化多核苷酸模板配对末端测序方法,其特征在于,包括以下操作步骤:S1、提供固定在固体支持物上的阵列的单链模板多核苷酸,作为第一端测序模板链,加入第一测序引物,对单链模板多核苷酸至少部分序列进行测序,获得第一测序引物的延伸链和对应的第一末端序列信息;S2:以第一端测序模板链为模板,形成与第一端测序模板链全长互补的多核苷酸链,称为互补链;S3:将第一端测序模板链的3’端与互补链的5’端连接,解除第一端测序模板链和互补链的双链杂交结构,并封闭第一端测序模板链,阻止复性环境下互补链与第一端测序模板链重新杂交;S4:加入与互补链的3’端互补配对的第二测序引物,对互补链的至少部分序列进行测序,获得第二末端序列信息;步骤S2中形成互补链的具体方法为,第一测序引物的延伸链与第一端测序模板链解除双链结构,去除第一测序引物的延伸链,加入至少部分与第一端测序模板链的3’端互补的扩增引物,以第一端测序模板链为模板,延伸扩增引物形成与第一端测序模板链全长互补的多核苷酸链作为互补链;扩增引物为茎环结构,扩增引物的3’茎部分具有凸出的单链区域,至少部分的凸出的单链区域与第一端测序模板链的3’端互补配对;步骤S3中第一端测序模板链的3’端与互补链的5’端连接的方法为:加入连接酶将扩增引物5’端与第一端测序模板链的3’端连接;步骤S3中解除第一端测序模板链和互补链的双链杂交结构,并封闭第一端测序模板链的方法为:在变性条件下,第一端测序模板链和互补链解除双链杂交结构,形成长单链,之后加入仅与长单链的第一端测序模板链的3’端互补配对的第一延伸引物,第一延伸引物以第一端测序模板链为模板延伸形成与第一端测序模板链互补杂交的第一延伸引物链,封闭第一端测序模板链。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人郑州思昆生物工程有限公司,其通讯地址为:450001 河南省郑州市自贸试验区郑州片区(经开)经开第六大街133号1号厂房3号楼6层;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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