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南京立顶医疗科技有限公司张玉基获国家专利权

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龙图腾网获悉南京立顶医疗科技有限公司申请的专利一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120102870B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510587130.8,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡及其制备方法和应用是由张玉基;洪霞;陈贝贝;王鹏设计研发完成,并于2025-05-08向国家知识产权局提交的专利申请。

一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物检测技术领域,尤其是一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡及其制备方法和应用,其制备方法包括以下步骤:1)硅包高性能时间分辨荧光微球的制备;2)MxA抗体的标记;3)CRP抗体的标记;4)SAA抗体的标记;(5)结合垫的制备;(6)硝酸纤维素膜制备;(7)试剂条组装。本发明制备了一种粒径范围190‑352nm的硅包高性能时间分辨荧光微球,染料包埋率高,灵敏度高,单分散性好,稳定性好,亲水性强,不易团聚,提高了染料的包埋率。本发明利用该硅包高性能时间分辨荧光微球制备的MxA、CRP与SAA的联合检测卡能提升鉴别细菌感染和病毒感染的准确度,有利于急性呼吸道感染性疾病的早期诊断及治疗。

本发明授权一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种MxA、CRP与SAA的联合检测卡的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)硅包高性能时间分辨荧光微球的制备 ①采用溶胶-凝胶法制备SiO2微球:在乙醇水溶液中加入氨水,搅拌分散均匀后,逐滴加入正硅酸四乙酯,25-45℃反应过夜;乙醇与水的体积比为1:0-0.2,正硅酸四乙酯与氨水的体积比为1:0.1-1; ②采用超声溶胀法包埋时间分辨荧光染料EuⅢ配合物:将步骤①中的产物分散在SDS水溶液中制备乳液1,将EuⅢ配合物溶解在DCM溶液中制备溶液1;再将溶液1倒入乳液1中,避光振荡超声; ③采用硅烷偶联反应微球表面双键修饰:将步骤②中的产物分散在乙醇中,加入氨水,搅拌分散均匀,逐滴加入偶联剂乙烯基三乙氧基硅烷,室温反应过夜; ④采用超声溶胀法包埋时间分辨荧光染料EuⅢ配合物:将步骤③中的产物分散在SDS水溶液中制备乳液2,将EuⅢ配合物溶解在DCM溶液中制备溶液2;再将溶液2倒入乳液2中,避光振荡超声; ⑤采用种子乳液聚合法微球表面羧基修饰:将步骤④中产物分散在水溶液中,通N2除氧,然后加入适量的表面活性剂十二烷基硫酸钠,待溶解后,加入适量的羧酸单体甲基丙烯酸,60℃时加入引发剂过硫酸钾,70-85℃反应过夜; ⑥采用超声溶胀法包埋时间分辨荧光染料EuⅢ配合物:将步骤⑤中的产物分散在SDS水溶液中制备乳液3,将EuⅢ配合物溶解在DCM溶液中制备溶液3;再将溶液3倒入乳液3中,避光振荡超声; (2)MxA抗体的标记 ①清洗:取硅包高性能时间分辨荧光微球加入到含MES缓冲液的离心管中,超声混匀,离心弃上清; ②活化:将清洗的硅包高性能时间分辨荧光微球中加MES缓冲液,超声混匀后加入现配EDC和NHS,室温、避光活化30min,离心弃上清; ③偶联:活化后的硅包高性能时间分辨荧光微球中加入MES缓冲液,超声混匀;加入待偶联MxA标记抗体,涡旋混匀,室温、避光偶联2h; ④封闭:将上述偶联缓冲液中加入BSA和乙醇胺,室温、避光封闭1h,离心弃上清; ⑤复溶:将硅包高性能时间分辨荧光微球抗体复合物中加微球复溶液,2-8℃避光保存; (3)CRP抗体的标记 ①清洗:取微球加入到含MES缓冲液的离心管中,超声混匀,离心弃上清; ②活化:将清洗的硅包高性能时间分辨荧光微球中加MES缓冲液,超声混匀后加入现配EDC和NHS,室温、避光活化30min,离心弃上清; ③偶联:活化后的硅包高性能时间分辨荧光微球中加入MES缓冲液,超声混匀;加入待偶联CRP标记抗体,涡旋混匀,室温、避光偶联2h; ④封闭:将上述偶联缓冲液中加入BSA和乙醇胺,室温、避光封闭1h,离心弃上清; ⑤复溶:将硅包高性能时间分辨荧光微球抗体复合物中加微球复溶液,2-8℃避光保存; (4)SAA抗体的标记 ①清洗:取微球加入到含MES缓冲液的离心管中,超声混匀,离心弃上清; ②活化:将清洗的硅包高性能时间分辨荧光微球中加MES缓冲液,超声混匀后加入现配EDC和NHS,室温、避光活化30min,离心弃上清; ③偶联:活化后的硅包高性能时间分辨荧光微球中加入MES缓冲液,超声混匀;加入待偶联SAA标记抗体,涡旋混匀,室温、避光偶联2h; ④封闭:将上述偶联缓冲液中加入BSA和乙醇胺,室温、避光封闭1h,离心弃上清; ⑤复溶:将硅包高性能时间分辨荧光微球抗体复合物中加微球复溶液,2-8℃避光保存; (5)结合垫的制备;(6)硝酸纤维素膜制备;(7)试剂条组装。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人南京立顶医疗科技有限公司,其通讯地址为:210046 江苏省南京市栖霞区仙林街道仙林大学纬地路9号C6栋408、409、410室;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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