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申请/专利权人:中国农业科学院饲料研究所
摘要:本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICMP1102中的AOX启动子,构建组成型重组表达载体pGAPMP1102并转化毕赤酵母X-33,获得的重组酵母经发酵培养,能够分泌产生MP1102。本发明首次实现菌丝霉素衍生物MP1102在毕赤酵母中组成型表达,经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到387.6mgL;发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品,产量为105.84mgL;经Genetools分析其纯度为95.13%。抑菌实验表明MP1102对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用,MP1102的MIC介于0.0028-0.11μM。本发明所述方法获得的MP1102可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域,具有广阔的应用价值和市场前景。
主权项:一种表达载体,其特征在于,含有毕赤酵母组成型启动子GAP、位于启动子下游的编码信号肽的核苷酸序列、编码菌丝霉素衍生物MP1102的基因序列和TAA,TAG终止子序列;所述菌丝霉素衍生物MP1102的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示;所述编码菌丝霉素衍生物MP1102的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国农业科学院饲料研究所 在Pichia pastoris中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法
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