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申请/专利权人:奥维森基因科技(天津)有限公司
摘要:本发明提供了一种基于Sanger测序的黄热病毒全基因组测序方法、成套引物对和应用,涉及病毒检测技术领域。该方法包括提供黄热病毒的cDNA;然后使用成套引物对对黄热病毒的cDNA进行PCR扩增,得到位于黄热病毒全基因组中不同区域的片段,相邻片段之间含有用于拼接的重叠区域;各片段拼接后的全序列覆盖黄热病毒全基因组全长;使用Sanger双脱氧链终止法对PCR扩增产物进行测序,然后对测序序列进行拼接。该测序方法操作简单,测序结果准确度高,用于检测黄热病毒减毒活疫苗中的毒株可以从基因组的序列水平上保证毒株没有发生突变,毒性没有发生改变,进而确保了疫苗生产的安全性。
主权项:1.一种基于Sanger测序的黄热病毒全基因组测序方法,其特征在于,包括如下步骤:a使用成套引物对对黄热病毒的cDNA进行PCR扩增,得到位于黄热病毒全基因组中不同区域的片段,相邻片段之间含有用于拼接的重叠区域;各片段拼接后的全序列覆盖黄热病毒全基因组全长;b回收各片段的PCR扩增产物;c使用Sanger双脱氧链终止法对步骤c的PCR扩增产物进行测序,然后对测序序列进行拼接,得到黄热病毒全基因组序列。
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百度查询: 奥维森基因科技(天津)有限公司 基于Sanger测序的黄热病毒全基因组测序方法、成套引物对和应用
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