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申请/专利权人:南通大学附属医院
摘要:一种基于胰腺脱细胞支架的胰腺癌体外3D模型的构建方法,属于组织工程及肿瘤侵袭、转移及耐药技术领域;一种基于胰腺脱细胞支架模拟肿瘤在体微环境,经再种植胰腺癌细胞,构建胰腺癌体外3D培养模型。在传统2D培养基于细胞‑细胞相互作用的基础上,引入了细胞‑细胞外基质以及三维空间结构,肿瘤细胞可在其中呈三维立体结构生长,表现为圆形及卵圆形的细胞形态,并可见核质比及核分裂像的改变。该模型的构建包括下列步骤:⑴胰腺组织获取;⑵经水合脱细胞法处理并评价脱细胞效果;⑶钴—60辐照灭菌;⑷胰腺癌细胞再种植及功能评价。
主权项:1.一种基于胰腺脱细胞支架的胰腺癌体外3D模型的构建方法,所述胰腺脱细胞支架来源于小鼠、大鼠和猪胰腺,所述将胰腺脱细胞支架作为体外肿瘤模型,其特征在于所述构建方法为:步骤1、胰腺脱细胞支架通过钴—60辐照灭菌,灭菌后在37℃的培养基中孵育5分钟;步骤2、将1×107的胰腺癌细胞数经胰酶消化后加入4ml培养基,充分混匀,经脾动脉分4次缓慢注射,每次1ml,间隔15分钟,在37℃的5%CO2培养箱中静置2小时后进行1mlmin循环灌注,每日更换培养基,循环灌注培养5天,获得基于胰腺脱细胞支架的胰腺癌体外3D模型。
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