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申请/专利权人：上海交通大学云南(大理)研究院;上海交通大学

摘要：本发明属于化学物质检测技术领域，尤其是涉及一种基于核酸适配体的SYBRGREENI荧光法检测苯嗪草酮的方法。苯嗪草酮核酸适配体溶液中加入SYBRGreenI溶液时，使得SYBRGreenI荧光探针嵌入苯嗪草酮核酸适配体所形成的G‑四连体结构当中，在激发波长485nm和发射波长535nm处产生强烈的荧光强度表达，当体系中存在苯嗪草酮时，核酸适配体与苯嗪草酮结合，核酸适配体结构发生改变，G‑四连体结构打开，从而导致SYBRGreenI荧光探针无法嵌入核酸适配体，导致低的荧光信号表达，通过测定荧光强度的衰减△F来判断待测溶液中苯嗪草酮的含量。与现有技术相比，本发明提供的检测方法可用于检测水样中苯嗪草酮的含量，检测的浓度范围是20‑120nmolL。

主权项：1.一种基于核酸适配体的SYBRGREENI荧光法检测苯嗪草酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、准备苯嗪草酮核酸适配体，所述苯嗪草酮核酸适配体核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；B、在所述苯嗪草酮核酸适配体溶液中加入SYBRGreenI溶液，混匀孵育，使得所述SYBRGreenI荧光探针嵌入苯嗪草酮核酸适配体所形成的双链当中，加入已知浓度的苯嗪草酮的水溶液和3-丙磺酸缓冲液，混匀孵育，在激发波长485nm和发射波长535nm处测定荧光强度F，并以不加苯嗪草酮的水溶液作为对照组，测定荧光强度F0，依据荧光强度计算不同已知浓度的苯嗪草酮的水溶液荧光强度的衰减ΔF＝F0-F；C、基于苯嗪草酮的浓度和荧光强度的衰减ΔF，拟合得到直线方程；D、在所述苯嗪草酮核酸适配体溶液中加入SYBRGreenI溶液，混匀孵育，使得所述SYBRGreenI荧光探针嵌入苯嗪草酮核酸适配体所形成的双链当中，加入待测溶液和3-丙磺酸缓冲液，混匀孵育，在激发波长485nm和发射波长535nm处测定荧光强度F，并以不加待测苯嗪草酮的水溶液作为对照组，测定荧光强度F0，依据荧光强度计算待测溶液荧光强度的衰减ΔF＝F0-F；E、基于拟合得到的直线方程，以及待测溶液对应的荧光强度的衰减ΔF，得到待测溶液中苯嗪草酮的含量。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海交通大学云南(大理)研究院 上海交通大学 基于核酸适配体的SYBR GREEN I荧光法检测苯嗪草酮的方法