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申请/专利权人:河北一然生物科技股份有限公司
摘要:本发明涉及一种益生菌配方设计方法,其包括:S1、制备粪便发酵无菌液:取健康人的新鲜粪便,加生理盐水匀浆,经滤网过滤去除残渣后,得粪便样品;将粪便样品接种到培养基中发酵培养,得粪便发酵液;将粪便发酵液离心,去除菌泥,收集上清液,经微滤膜过滤去除上清液中的菌体,制得粪便发酵无菌液;S2、以粪便发酵无菌液模拟人体肠道环境,将益生菌以已知接种浓度接种到粪便发酵无菌液中,并待考察益生元,培养预定时间后统计乳益生菌的增殖情况,根据增殖情况选定益生元与益生菌组配。本发明实现益生菌与益生元组合配方的优化设计,使益生元能有效促进益生菌增殖,促进益生菌发挥其功能。本发明还及利用该方法进行调节肠道提高免疫的乳双歧杆菌BAL531的配方设计。
主权项:1.一种益生菌配方设计方法,其特征在于,其包括:S1、制备粪便发酵无菌液,方法为:S11、取健康人的新鲜粪便,加生理盐水混匀,经滤网过滤去除残渣后,滤液为粪便样品;每1g新鲜粪便加8-12mL生理盐水,振荡混匀后,采用800目无菌滤网滤去残渣,得粪便样品;S12、将粪便样品接种到培养基中发酵培养,得到粪便发酵液;所述培养基为YCFA培养基,其成分为:0.8-1.2gL阿拉伯半乳聚糖、1.5-2.5gL果胶、0.8-1.5gL木聚糖、2.8-3.5gL淀粉、0.3-0.5gL葡萄糖、2.5-4gL酵母膏、2-3.5gL蛋白胨、0.7-1.5gLNaCl、0.4-0.6gLKH2PO4、0.4-0.6gLK2HPO4、0.3-0.5gLCaCl2.2H2O、0.05-0.10gLMgSO4.7H2O、0.008-0.012gL氯化血红素,并加入0.2-0.3μgL维生素混合物;S13、将粪便发酵液离心,去除菌泥,收集上清液,经微滤膜过滤去除上清液中的菌体,制得粪便发酵无菌液;微滤膜孔径为0.22μm,过滤2-4次,以尽量去除上清液中的菌体,制得粪便发酵无菌液;S2、以步骤S1制备的粪便发酵无菌液模拟人体肠道环境,将益生菌以已知接种浓度接种到粪便发酵无菌液中,同时加入已知量的待考察益生元,共同培养预定时间后,统计益生菌的增殖情况,根据增殖情况选定益生元并与益生菌组配,完成益生菌配方设计;所述益生菌为乳双歧杆菌BAL531,保藏编号为CGMCCNo.17329。
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