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一种利用地中海富盐菌CRISPR-Cas系统实现基因编辑及提高PHBV产量的方法 

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申请/专利权人:中国科学院微生物研究所

摘要:本发明公开了一种利用地中海富盐菌CRISPR‑Cas系统实现基因编辑及提高PHBV产量的方法。本发明基因编辑方法包括:向地中海富盐菌导入能表达靶向目的区域的crRNA表达盒由PphaR启动子SEQIDNo.1、N个spacer序列靶向所述目的区域间隔的N+1个相同的repeat序列SEQIDNo.2和终止子组成。有同源臂时,结合同源重组修复系统,可实现靶标精确编辑;增加crRNA数量可提高大片段删除效率。无同源臂时,依据Cas3效应蛋白双向切割特性及微同源末端修复系统,可实现基因组靶向位置周围非必需基因连续删除获得精简基因组。抑制同源重组修复系统,可提高基因组精简效率。

主权项:1.一种对地中海富盐菌进行基因编辑的方法,包括如下步骤:向地中海富盐菌受体菌株中导入能够表达靶向目的区域的crRNA的表达盒,从而实现对所述目的区域的编辑;所述表达盒由如下1-3顺次连接而成:1PphaR启动子;2由N个spacer序列间隔的N+1个相同的repeat序列;N为大于等于1的正整数;3终止子序列;所述PphaR启动子序列如SEQIDNo.1所示;所述repeat序列如SEQIDNo.2所示;所述spacer序列靶向所述目的区域。

全文数据:

权利要求:

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