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申请/专利权人：江苏大学

申请日：2023-07-22

公开（公告）日：2023-12-08

公开（公告）号：CN117192103A

专利技术分类：....用不溶解的载体固定免疫化学物品[2006.01]

专利摘要：胶体金检测二噁英所需胶体金探针的制备方法，包括缓冲液配制与预处理、胶体金制备、胶体金标记探针制备、胶体金免疫层析试纸条组装四个步骤；缓冲液配制与预处理包括9个分步骤，胶体金的制备包括三个分步骤；述胶体金标记探针的制备包括三个流程；胶体金免疫层析试纸条由PVC底板、样品垫、金标垫、检测线、质控线、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。本发明以二噁英为检测目标物，利用现有实验室制备的二噁英单链抗体和包被原TCDD‑BSA为基础，通过制备出胶体金探针和优化pH、抗体量、探针量等条件后，进行胶体金试纸条组装，用于检测样品中的二噁英，为有效检测二噁英起到了有利技术支持。

专利权项：1.胶体金检测二噁英所需胶体金探针的制备方法，其特征在于，包括缓冲液配制与预处理、胶体金制备、胶体金标记探针制备、胶体金免疫层析试纸条组装四个步骤；所述缓冲液配制与预处理包括如下分步骤，1制备样品垫处理液，2制备金标垫封闭液，3制备碳酸钾溶液，4制备四氯金酸浓缩液，5制备柠檬酸三钠液，6制备BSA溶液，7制备硼酸盐缓冲液，8玻璃器皿预处理，9金标垫和样品垫处理；所述胶体金的制备中，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，包括如下流程，1稀释四氯金酸溶液，2取部分稀释液于烧杯中于磁力搅拌器煮沸、加入柠檬酸三纳溶液搅拌、加热沸腾，室温避光冷却备用，3通过透射电子显微镜TEM和紫外分光光度计进行表征；所述胶体金标记探针的制备包括如下流程，1取二噁英单链抗体室温下反应、并加入BSA溶液进行封闭，2室温磁力搅拌并离心吸取上清、再离心弃上清，3用硼酸盐缓冲液复溶，即得到二噁英胶体金探针、并避光保存；所述胶体金免疫层析试纸条由PVC底板、样品垫、金标垫、检测线、质控线、硝酸纤维素膜和吸水垫组成，其中检测线和控制线分别采用TCDD-BSA和羊抗鼠IgG抗体喷涂于NC膜，于37℃下烘干，具体生产流程如下，首先将NC膜贴在PVC底板中间，样品垫、金标垫、吸水垫依次贴于NC膜上，最后采用试纸条自动切割仪切成试纸条，干燥装入密封袋储存备用。

百度查询： 江苏大学 胶体金检测二噁英所需胶体金探针的制备方法