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基于DNA-铜纳米簇与HCR信号放大的CRISPR/Cas12a检测系统及其应用 

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申请/专利权人:南京师范大学

摘要:本发明公开了基于DNA‑铜纳米簇与HCR信号放大的CRISPRCas12a检测系统及其应用,所述检测系统包括DNA‑铜纳米簇体系、HCR反应体系、CRISPRCas12a识别体系;所述HCR反应体系包括启动链inDNA、两种发夹DNA以及沉默链siDNA,其中所述启动链inDNA包含触发HCR的序列;siDNA具备结合HCR反应体系中的启动链inDNA的能力,用于沉默HCR反应;当分析的目标核酸存在时,激活CRISPRCas12a识别体系,不断切割环境中的沉默链siDNA,结合启动链inDNA的siDNA被切割后,启动链inDNA触发HCR反应,使两种稳定共存的发夹DNA打开后,交替互补形成具有切口的长链DNA,该长链DNA上规律分布polyAT‑TA,铜原子聚集在富含polyAT‑TA的DNA链上形成DNA‑铜纳米簇,发出粉红色荧光,进行荧光检测。本发明制备的检测系统灵敏度高、特异性好、检测限低、稳定性好。

主权项:1.一种基于DNA-铜纳米簇与HCR信号放大的CRISPRCas12a检测系统,其特征在于,所述检测系统包括DNA-铜纳米簇体系、HCR反应体系、CRISPRCas12a识别体系;所述HCR反应体系包括启动链inDNA、两种发夹DNA以及沉默链siDNA,其中所述启动链inDNA包含触发HCR的序列;siDNA具备结合HCR反应体系中的启动链inDNA的能力,用于沉默HCR反应;当分析的目标核酸存在时,激活CRISPRCas12a识别体系,不断切割环境中的沉默链siDNA,结合启动链inDNA的siDNA被切割后,启动链inDNA触发HCR反应,使两种稳定共存的发夹DNA打开后,交替互补形成具有切口的长链DNA,该长链DNA上规律分布polyAT-TA,铜原子聚集在富含polyAT-TA的DNA链上形成DNA-铜纳米簇,发出粉红色荧光,进行荧光检测。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南京师范大学 基于DNA-铜纳米簇与HCR信号放大的CRISPR/Cas12a检测系统及其应用

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