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申请/专利权人：江苏大学
摘要：本发明公开了一种三驱动增强型适体双模式分析ZEN的方法，属于生化分析检测技术领域。所述三驱动是指在ExoI酶切循环放大、Poly‑HRP催化放大、荧光协同放大下的增强型驱动，所述双模式是指比色和荧光信号模式。本发明首先制备磁性检测探针，然后加入ZEN和ExoI酶，哑铃型探针从磁性检测探针上释放，并且循环累积放大，GO表面吸附淬灭的哑铃型探针被互补链DNA2解离，再进行比色检测和荧光检测。本发明的三驱动增强型适体双模式分析ZEN的方法的灵敏度比现有报道的适体传感分析方法提高4‑14倍。该分析方法简便快速、均相高效、高灵敏、双模式、应用潜力大。
主权项：1.一种三驱动增强型适体双模式分析ZEN的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1适配体及互补链的设计：基于可识别待测目物ZEN的适配体，设计互补链cDNA1和cDNA2；所述的互补链cDNA1与适配体互补结合，互补链cDNA2与cDNA1互补结合；2磁性检测探针制备：制备Apt-MBs探针：将SA-MBs重悬、磁分离、清洗后，加入降温退火后的适配体和Tris-EDTA缓冲液，室温下振荡反应，去除上清液后清洗保存；制备哑铃型探针：取生物素修饰的聚辣根过氧化物酶Poly-HRPPoly-HRP-SA与cDNA1，混合均匀后孵育反应，得到Poly-HRP-cDNA1-FAM哑铃型双信号探针；制备磁性检测探针：取哑铃型双信号探针与Apt-MBs探针混合，孵育反应后获得磁性检测探针；3ExoI酶切循环信号放大：在步骤2得到的磁性检测探针中加入含有待测目标物ZEN的样品和氧化石墨烯溶液孵育反应，然后在体系中加入ExoI，孵育反应；4解吸附与荧光恢复：取步骤3反应得到的上清液，加入cDNA2，孵育反应；5双模式读取检测：在步骤4的产物中一部分加入TMB显色液，室温下反应后，加入硫酸溶液终止反应，读取吸光度值；另一部分加入SGI，室温反应后，测定荧光值；根据吸光度值和荧光值分别与待测目标物浓度之间的响应关系，得到待测目标物ZEN的浓度。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏大学 一种三驱动增强型适体双模式分析ZEN的方法
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