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申请/专利权人:河南省儿童医院郑州儿童医院
摘要:本研究旨在成功建立一种缺氧性脑损伤斑马鱼幼鱼模型,并观察动物的神经行为及脑组织病理形态学改变以评价模型的稳定性,目的是制作出高效、贴近临床、重复性好的缺氧性脑损伤动物模型,便于进一步研究缺氧性脑损伤的发病机制及其病理生理变化,同时为脑保护干预措施如何实施提供一定的依据。斑马鱼幼鱼禁食处理后,35℃的高温刺激加上低氧环境,同时醋酸和乙醇浸泡,再结合1500Lux的强光刺激和波长30‑40μm、强度为60‑80mwcm2的电磁波照射,多种方法相互配合协同、相互促进加强,共同高效诱导了斑马鱼幼鱼的脑细胞损伤凋亡,缺氧沉底+苏醒总时间19‑26min即成功制备了缺氧性脑损伤斑马鱼模型,大大提高了缺氧性脑损伤斑马鱼幼鱼模型的制备效率。
主权项:1.一种缺氧性脑损伤斑马鱼模型的制备方法,其特征在于,包括以下歩骤:1、禁食处理:选取发育正常、活力良好、游泳能力良好的8dpf斑马鱼幼鱼,暂养于过渡鱼缸中,暂养环境为:pH值为7.0-7.2,盐度为0.03%~0.04%,溶氧量为6.5mgL,水温25℃,光照黑夜为14h∶10h;禁食24小时。2、高温刺激、醋酸和丙酮浸泡:幼鱼在过渡鱼缸中禁食24小时后,将其转移至试验鱼缸中,试验鱼缸的水温为35℃,溶氧量为0.5mgL;试验鱼缸的水体中添加有醋酸和丙酮,醋酸和丙酮在养殖水体中的浓度分别为80~100mlm3、60~70mlm3。3、强光刺激、电磁波照射:试验鱼缸的内安装有光照强度1500Lux的强光灯;同时使用特定波普仪,对幼鱼进行电磁波照射,所述特定波普仪发出的电磁波波长30-40μm,强度为60-80mwcm2。禁食处理后的幼鱼转移至试验鱼缸8-10min后,斑马鱼幼鱼全部沉于水底、静止不动,沉底1min后,迅速将其捞出;转移回过渡鱼缸复氧,幼鱼在10-15min内即全部苏醒;最终制备获得缺氧性脑损伤斑马鱼模型。
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