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申请/专利权人:广西特色作物研究院
摘要:本发明公开了无芒雀麦提取物在防治桃细菌性穿孔病中的应用。本应用通过碱提酸沉法提取无芒雀麦中的活性成分,经柱层析色谱纯化得到抑菌组分。抑菌组分主要含对香豆酸和阿魏酸,含量分别为694.2和259.6mgg。抑菌组分及其主要成分对桃细菌性穿孔病病原菌树生黄单胞李致病变种,Xanthomonasarboricolapv.pruni,Xap具有良好的抑菌活性,抑菌组分、对香豆酸、阿魏酸和阳性照药物土霉素对最小抑制浓度为0.25、0.0625、0.50和0.125mgmL。相比现有技术的优点在于:无芒雀麦来源丰富,抑菌组分制备方法简单,其主要成分对香豆酸抑制活性优于土霉素。
主权项:1.无芒雀麦提取物在防治桃细菌性穿孔病中的应用,其特征在于:包括如下步骤:1原材料制备:收集无芒雀麦,干燥,粉碎,备用;2粗提物制备;采用碱提酸沉法提取无芒雀麦抑菌物质得到提取液,得到的提取液用3倍体积乙酸乙酯萃取,萃取3次,合并萃取液,回收乙酸乙酯得到粗提物;所述的碱提酸沉法是指按固液比1:50加入0.5molLNaOH溶液提取,提取条件:50℃,超声提取3h,提取频率40KHz,提取完成后加入2.0molL盐酸溶液调pH至中性,过滤得到提取液;3无芒雀麦抑菌组分制备;将得到的提取液用硅胶柱层析纯化得到无芒雀麦抑菌组分;所述的硅胶柱层析是指活性物质溶解于甲醇,按20倍质量硅胶吸附活性物质得到载样硅胶,选择合适大小的层析柱对载样硅胶进行柱层析,确保载样硅胶在层析柱中的高度2-3cm,层析硅胶高度为载样硅胶的2倍,用二氯甲烷-乙酸乙酯体系进行洗脱,二氯甲烷洗脱2倍柱体积,回收二氯甲烷,再用二氯甲烷:乙酸乙酯=3:1洗脱4倍柱体积,收集馏分,旋干溶剂后,干燥,得到无芒雀麦抑菌组分;4抑菌组分主要成分含量测定;利用高效液相色谱法测定抑菌组分中对香豆酸和阿魏酸的含量;5抑菌活性测试;以体积浓度10%DMSO溶液为溶剂,配成6个不同浓度无芒雀麦抑菌组分、对香豆酸、阿魏酸溶液,以土霉素为阳性对照,10%DMSO溶液为空白对照,采用抑制圈法测定抑制圈大小和最小抑制浓度;所述的抑菌活性测试的菌株是指树生黄单胞李致病变种Xanthomonasarboricolapv.pruni,Xap。
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