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申请/专利权人:北京力邦生物医药科技有限公司
摘要:本发明提供了一种表达荧光素酶报告基因的Raji细胞的构建方法及应用,包括以下步骤:S1,准备Raji细胞及带有Luc基因和遗传霉素抗性基因的重组质粒;S2,将重组质粒转染进稳定传代的Raji细胞中;S3,对转染后的Raji细胞pool进行遗传霉素加压筛选;S4,对筛选后存活的细胞pool进行荧光素酶检测,挑选出荧光素酶表达量高的最优的5个细胞pool;S5,对筛选出的细胞pool进行单克隆化,并进行荧光素酶检测,筛选出荧光素酶表达量高的7株单克隆阳性细胞株扩大培养;S6,对经过扩大培养的单克隆细胞株进行荧光素酶检测,挑选出最优细胞株进行建库。本发明建立的Raji细胞系可以稳定表达荧光素酶报告基因,抗体的生物活性可通过靶细胞的存活情况来反映。
主权项:1.一种表达荧光素酶报告基因的Raji细胞的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,准备Raji细胞及带有Luc基因和遗传霉素抗性基因的重组质粒;S2,将重组质粒转染进稳定传代的Raji细胞中;S3,对转染后的Raji细胞pool进行遗传霉素加压筛选;S4,对筛选后存活的细胞pool进行荧光素酶检测,挑选出荧光素酶表达量高的最优的5个细胞pool;S5,对筛选出的细胞pool进行单克隆化,并进行荧光素酶检测,筛选出荧光素酶表达量高的7株单克隆阳性细胞株扩大培养;S6,对经过扩大培养的单克隆细胞株进行荧光素酶检测,挑选出最优细胞株进行建库。
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权利要求:
百度查询: 北京力邦生物医药科技有限公司 一种表达荧光素酶报告基因的Raji细胞的构建方法及应用
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